miRNA-214对早期股骨头坏死Bio-oss骨粉联合BMSCs细胞移植疗法中骨新生的调控研究

批准号:
81401811
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
23.0 万元
负责人:
王宇英
依托单位:
学科分类:
H0605.骨、关节、软组织移植与重建
结题年份:
2017
批准年份:
2014
项目状态:
已结题
项目参与者:
罗雄剑、王文峰、王颖佳、余东亮、郑东旺、杨晓彦
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中文摘要
现对股骨头坏死的治疗方法种种,细胞移植是最新且具有潜力的方法但临床效果均不尽完善,要达到更好的治疗效果必须要从分子水平提高坏死区修复速度。最新的研究报道miRNA-214的靶基因是Atf4或Osterix,两者是对成骨细胞分化和骨形成至关重要的因子。结合我们的预实验结果提示着:miRNA-214可能在ONFH早期骨修复阶段发挥作用,也可能是ONFH治疗中的一个潜在策略。.我们分别构建miRNA-214激动剂和miRNA-214拮抗剂处理BMSCs细胞,检测miRNA-214对成骨特异性标记物的影响;动物模型体内试验考察Bio-oss骨粉联合处理后的BMSCs细胞移植对骨组织修复的效果;分别构建Atf4和Osterix的野生型和突变型荧光素酶报告质粒,转染入细胞进行双荧光素酶报告分析检测miRNA-214在ONFH的靶基因。本课题将为治疗ONFH提供有力的实验依据。
英文摘要
Recently reports showed that transplanting is new potential therapy for curing early-stage osteonecrosis of the femoral head(ONFH). However, it still exist many disadvantages. In order to get better therapeutic effect, it is necessary to enhance the bone turnover in the osteonecrosis area. The newest research reported that the target gene of miRNA-214 is Atf4 or Osterix, which are the crucial factor for the osteoblast differentiation and bone formation. Accordingly, we speculate that miRNA-214 may play an important role at early stage of bone repair, or is a potential strategy in ONFH treatment. .We will treat cells using miRNA-214 agonist and miRNA-214 antagonist respectively, then measure the influence of miRNA-214 to the specific markers of osteoblast differentiation; analysis the effect of miRNA-214 in the co-therapy of Bio-oss and BMSCs in early-stage osteonecrosis of the femoral head animal model; we will also transfect cells with Atf4 or Osterix luciferase plasmid to measure the target gene in ONFH. We investigate the function of miRNA-214 in the co-therapy of Bio-oss and BMSCs in early-stage osteonecrosis of the femoral head. This should be significant for treating of ONFH..
股骨头坏死(ONFH)是骨科常见的疑难病,其病变晚期致残率高,严重影响患者生活质量也给社会带来巨大的人力财力损失,但到目前为止尚未建立起成熟的治疗体系。目前认为,治疗重点在于防止关节面塌陷,加速股骨头坏死区域的成血管和成骨作用。虽然传统疗法取得了一定效果但其安全性高效性受到种种限制,要达到更好的治疗效果甚至要逆转股骨头坏死病理进展,必须要从分子水平提高坏死区修复速度。.骨髓间充质干细胞(BMSC)是未分化的多潜能细胞,是理想的组织工程种子细胞。近年有关研究报道了股骨头坏死与成骨细胞及骨髓基质干细胞的功能不全及数量不足密切相关,但也有报道发现干细胞植入与传统髓心减压法疗效无显著差异,其原因可能在单纯干细胞的植入缺乏良好的骨支架材料。Bio-oss 骨粉是一种自体骨替代物质及骨组织再生支架,具有良好的生物相容性,是一种很有前途的 ONFH 骨支架材料。但有研究报道了 Bio-oss 对成骨样细胞系的基因调节,被上调的 miRNAs 中包括 miRNA-214。MicroRNA(miRNA)是一类大小约 21-25 个核苷酸的非编码 RNA,其功能是在转录水平上对靶基因表达产生抑制性作用。近几年的研究表明了 microRNA 在成骨细胞生物学中发挥着重要作用。.本课题探讨了miRNA-214对股骨头坏死 Bio-oss 骨粉联合BMSCs 细胞移植疗法中骨新生的调控功能。实验结果显示:(1)酒精性股骨头坏死模型组表现为骨组织和骨髓内细胞坏死、浆消失、空泡状基质裂隙,骨陷窝空虚扩大,骨小梁出现灶状坏死,可见纤维结缔组织增生;(2) Bio-oss骨粉联合BMSCs 细胞移植实验组表现为新生组织张入坏死区,新的成骨细胞出现;(3) agomiRNA-214移植实验组表现与移植实验组相似;(4) antagomiRNA-214移植实验组可见成骨细胞紧密排列于骨小梁表面。除模型组外,其余三组均可见成骨细胞不同程度激活,但以antagomiRNA-214移植实验组成骨细胞状态表现最活跃。本课题为microRNA在股骨头坏死治疗的应用潜力提供实验依据。
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Pou4f2-GFP knock-in mouse line: A model for studying retinal ganglion cell development
Pou4f2-GFP 敲入小鼠系:研究视网膜神经节细胞发育的模型
DOI:10.1002/dvg.22960
发表时间:2016
期刊:genesis
影响因子:1.5
作者:王宇英
通讯作者:王宇英
DOI:10.11648/j.ajcem.20160406.19
发表时间:2016-12
期刊:American Journal of Clinical and Experimental Medicine
影响因子:--
作者:王宇英
通讯作者:王宇英
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