LBP佐剂调控TLR/Blimp-1促进cDC2s诱导记忆性Tfh细胞参与FMD疫苗免疫机制研究

批准号:
31860695
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
42.0 万元
负责人:
苏春霞
依托单位:
学科分类:
C1804.兽医免疫学
结题年份:
2022
批准年份:
2018
项目状态:
已结题
项目参与者:
崔瑞琴、张炜、王娜、王宁萍、兰亚如、孙鹏、沈春秀
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中文摘要
滤泡辅助性T细胞(Tfh)是专职辅助B细胞参与体液免疫的T细胞亚群,因此,如何有效诱导Tfh细胞,特别是记忆性Tfh细胞分化是疫苗设计的新策略。我们研究发现,枸杞多糖(LBP)佐剂能促进树突状细胞(DCs)诱导Tfh细胞分化,但机制尚不清楚。最新研究发现,DCs缺失Blimp-1后优先诱导Tfh细胞分化。我们推测,LBP可能通过Toll样受体(TLR)下调Blimp-1,诱导Tfh细胞分化。本研究拟通过体外过表达或沉默Blimp-1后,流式细胞术、qPCR、wester-blot及ELISA检测沉默或过表达Blimp-1后对LBP诱导cDC2s成熟的影响,明确其在LBP促进cDC2s诱导Tfh细胞分化中的作用;通过阻断TLR-p38MAPK/NF-κB通路后,寻找LBP调控TLR/Blimp-1的关键靶点,阐明LBP佐剂负向调控Blimp-1促进cDC2s诱导Tfh细胞分化的分子机制;最后,以口蹄疫重组疫苗为抗原,探讨LBP佐剂促进cDC2s成熟及其诱导记忆性Tfh细胞参与疫苗免疫应答的机制,为LBP开发为新型佐剂提供理论依据。
英文摘要
Follicular helper T cells (Tfh) represent the subpopulation of T cells that provides help for B cells to participate in humoral immunity.Therefore, how to effectively induce differentiation of Tfh cells, especially the memory Tfh cells, is a new strategy for vaccine design. Our study shows that Lycium barbarum polysaccharide (LBP) as the adjuvant can promote dendritic cells (DCs) inducing the differentiation of Tfh cells, but the mechanism is not yet clear. The latest research shows that Blimp-1-deficient cDCs preferentially induce Tfh cells. We speculate that LBP can induce the differentiation of Tfh cells by negative regulating Blimp-1 through Toll like receptor (TLR). In this study, the effects of Blimp-1 overexpression or silencing on the maturation of cDC2s induced by LBP were investigated by flow cytometry, qPCR, wester-blot and ELISA.Searching the key target for LBP regulation of TLR/Blimp-1 by blocking TLR-p38 MAPK/NF-κB signaling pathway, to elucidate the molecular mechanism of LBP adjuvant promoting cDC2s induced differentiation of Tfh cells by negative regulating of Blimp-1. Recombinant foot-and-mouth disease vaccine as antigen to explore the mechanism of LBP adjuvant promote cDC2s induced memory Tfh cells involved in the immune response to the vaccine, which contributing the theoretical basis for development of LBP as a vaccine adjuvant.
我们研究发现,枸杞多糖(LBP)能促进口蹄疫(FMD)重组腺病毒疫苗(rAd5VP1)诱导滤泡辅助性T细胞(T follicular helper cells,Tfh)的分化,Tfh细胞是专职辅助B细胞参与体液免疫的T细胞亚群,因此,探讨LBP如何诱导Tfh细胞分化的机制十分重要。我们研究证实,LBP体外能促进小鼠骨髓树突状细胞(DCs)的成熟,且能促进DC诱导Tfh细胞分化。小鼠体内研究发现,LBP能促进rAd5VP1诱导小鼠脾脏DC的成熟、促进Th2和Tfh细胞的分化。LBP显示良好的佐剂效应,但其促进DC成熟的具体机制尚不清楚,本研究以TLR4为切入点,探讨其促进DC成熟的分子机制。体外研究结果证实,LBP能增强DC中TLR4通路中关键分子NFκB、p38、Erk1、Erk2、JNK、Blimp1及DC亚型相关转录因子IRF4、IRF5、IRF8、Batf3 mRNA和磷酸化蛋白表达水平;TLR4通路中关键分子TLR4、NFκB、p38、Erk、JNK被阻断后,能有效干预LBP促进DC中Blimp-1的表达;沉默Blimp-1后可影响LBP诱导DC成熟,研究结果提示,Blimp-1在LBP经TLR4通路诱导DC成熟过程中发挥重要作用。小鼠体内研究结果证实,LBP增强小鼠脾脏CD11c+DCTLR4通路中p-NFκB、p-p38、p-Erk1/2、Blimp1分子和DC亚型相关分子IRF4、IRF8蛋白的表达。因此,本研究结果证实,LBP可通过TLR4-NFκB/Erk1/2-Blimp1信号通路促进DC成熟,并诱导cDC1s和cDC2s的分化,我们推测,LBP可促进cDC2s诱导Tfh细胞的分化。本研究结果为LBP开发为口蹄疫疫苗新型佐剂提供理论依据。
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Lycium barbarum Polysaccharides Promote Maturity of Murine Dendritic Cells through Toll-Like Receptor 4-Erk1/2-Blimp1 Signaling Pathway.
枸杞多糖通过Toll样受体4-Erk1/2-Blimp1信号通路促进小鼠树突状细胞成熟
DOI:10.1155/2020/1751793
发表时间:2020
期刊:Journal of immunology research
影响因子:4.1
作者:Duan X;Lan Y;Zhang X;Hou S;Chen J;Ma B;Xia Y;Su C
通讯作者:Su C
DOI:--
发表时间:--
期刊:中国实验方剂学杂志
影响因子:--
作者:刘亚楠;杨皓凯;闫亚娟;杨小娟;段相国;苏春霞
通讯作者:苏春霞
DOI:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003516
发表时间:2019
期刊:病毒学报
影响因子:--
作者:孙鹏;杨荣敏;段相国;沈春秀;兰亚如;苏春霞
通讯作者:苏春霞
DOI:--
发表时间:2020
期刊:动物医学进展
影响因子:--
作者:兰亚如;孙鹏;段相国;沈春秀;张晓羽;王琦;苏春霞
通讯作者:苏春霞
DOI:10.3969/j.issn.1001-1978.2020.09.020
发表时间:2020
期刊:中国药理学通报
影响因子:--
作者:张晓羽;兰亚如;张晓娣;杨浩凯;李飞龙;薛晓楠;吴成;王琦;苏春霞
通讯作者:苏春霞
枸杞多糖CD155脂质体纳米粒基于Batf3-Irf8调控cDC1s激发CD8+T细胞抗肿瘤免疫的机制研究
- 批准号:82260819
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:33万元
- 批准年份:2022
- 负责人:苏春霞
- 依托单位:
TLR7激动剂Imiquimod负向调控Tfh细胞在系统性红斑狼疮中的作用机制研究
- 批准号:81560504
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:38.0万元
- 批准年份:2015
- 负责人:苏春霞
- 依托单位:
Ⅰ型干扰素介导Tfh细胞促进T细胞依赖性抗体反应的作用研究
- 批准号:31360600
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:50.0万元
- 批准年份:2013
- 负责人:苏春霞
- 依托单位:
滤泡辅助性T细胞辅助FMD表位疫苗B细胞免疫的机制研究
- 批准号:31001064
- 项目类别:青年科学基金项目
- 资助金额:19.0万元
- 批准年份:2010
- 负责人:苏春霞
- 依托单位:
国内基金
海外基金
