RNA干扰沉默NF-κB基因治疗神经病理性疼痛的实验研究

神经病理性疼痛不仅是医学界的难题，而且已成为社会经济的一大负担。NF-κB信号转导通路参与调控多种慢性疼痛相关介质基因的表达。我们前期研究利用反义寡核苷酸等相关技术证实NF-κB及其下游促炎性细胞因子参与调控神经病理性疼痛。RNA干扰是一种特异性高效基因阻断技术，与反义核酸技术相比特异性更强，效率更高，是一种可逆地、深入地解析基因功能的方法。本课题拟构建NF-κB p65 特异性小干扰RNA(siRNA) 表达载体，鉴定后转染体外培养的神经元和神经胶质细胞并通过核团和鞘内微量注射技术在体转染神经病理性疼痛模型大鼠，观察其对NF-κB基因表达的抑制效率，评价镇痛效果、作用时效和安全性，并应用ELISA、实时荧光定量PCR、免疫荧光双标等技术检测其下游疼痛相关介质的表达。通过探讨siRNA在不同神经细胞、不同中枢部位产生镇痛作用的可能性与机制，为寻找慢性疼痛治疗新靶点提供理论依据。