心肌缺血再灌注损伤中ROS爆发性形成及其作用靶点与氯离子动态变化关系的研究

研究报道心脏缺血再灌注损伤（I/R）时ROS的爆发性形成可能与AMP激活的蛋白激酶（AMPK）的持续激活有关，该损伤可被Cl- 转运体阻断剂DIDS取消，本研究拟从线粒体通透性转变孔（mPTP）开放角度，结合AMPK、Cl-转运等因素深入探讨ROS爆发的触发因素和作用靶点。采用P19CL6、P19CL6-shAE2细胞株，运用基因转染/共转染技术、RNAi技术上调和沉默AMPKα2、VDAC1基因，检测I/R时心肌细胞内ROS含量、线粒体mPTP开放情况、Cl-浓度及其他功能指标，研究AMPKα2是否触发RIRR及其与氯离子动态变化的关系，以及ROS爆发的作用靶点及其与氯离子动态变化的关系。最后构建AMPKα2 shRNA、VDAC１shRNA慢病毒载体，观察AMPKα2 蛋白以及VDAC１蛋白低表达大鼠模型对I/R反应性。本研究将从全新角度进一步阐明心肌缺血再灌注损伤及其保护的可能机制。