TFLK修饰肽调控肠道粘蛋白MUC3表达的分子机制研究

粘蛋白MUC3表达减少与肠道多种炎症性疾病的发生密切相关，上调其表达可增强肠道粘液屏障、促进炎症愈合。本课题组前期证实MUC3在不同种属初乳M-SAA3蛋白保守的TFLK基序修饰肽刺激下表达明显增加，这为MUC3相关性疾病的防治提供了重要线索，但其上调机制不清。转录水平调控是MUC3基因表达上调的关键。为揭示TFLK修饰肽上调MUC3表达的转录调控机制，本课题拟采用缺失突变技术、荧光素酶报告基因及转录因子活性谱芯片相结合的方法初步判断TFLK修饰肽上调MUC3表达起重要作用的启动子序列及转录因子；定点突变起主要作用的启动子序列，插入报告基因质粒，转染细胞，观察在修饰肽刺激下报告基因表达变化，验证其调控作用；EMSA、超迁移分析和竞争分析确定该（这些）转录因子；最后在动物模型上验证上述结论。本课题研究揭示的MUC3表达上调机制对增强肠道粘液屏障为肠道多种炎症性疾病防治提供了新的思路。