肿节风防护腮腺放射性损伤的作用机理研究

【主要内容】1.采用实验用巴马小型猪为实验对象，分别以单次大剂量（15Gy/1次）照射以及常规分割照射（30Gy/5次/5周）建立起肿节风干预下的腮腺放射性损伤实验动物模型，分为空白组(不做任何实验干预)、单照组(仅单纯照射)和药照组(照射的同时饲喂肿节风配方颗粒)；2.分别取照射后1天、10天、40天、90天小型猪腮腺标本进行研究：(1)用RT-PCR法及Western blotting法分别检测所取腮腺标本中的Bcl-2、Bax、P53和Caspase3 mRNA和蛋白表达的变化；(2)ELISA法检测腺体细胞内ROS的含量；(3)TUNEL法检测腮腺细胞原位凋亡；(4)免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。【结果】（1）在各个时间点，与空白组相比，单照组和药照组中Bax、P53及Caspase3的mRNA和蛋白表达水平均有所提高，三者的组间差异具有统计学意义(P<0.05)，其中单照组高于药照组； Bcl-2的表达，空白组高于药照组，药照组高于单照组，差异具有统计学意义(P<0.05)；（2）药照组ROS的含量在各个时点均低于单照组，差异均有统计学意义（P＜0.01），且在照射后10 d时肿节风对ROS的清除作用较强（P＜0.01）；(3) 在凋亡检测中我们发现：单照组与药照组在各时间点腮腺细胞凋亡率均高于空白组，与空白组相比差异均有统计学意义（P<0.01）；（4）单照组与药照组PCNA表达率在各时点均高于空白组，与空白组相比差异均有统计学意义（P<0.01）；而各时点比较，药照组PCNA表达率均高于单照组，差异有统计学意义（P<0.01）。【结论】肿节风能提高Bcl-2 mRNA及其蛋白的表达，降低Bax、P53及Caspase3 mRNA及其蛋白的表达，抑制细胞的过度凋亡，促进细胞的修复增殖；对腮腺放射损伤所产生的ROS有一定清除作用，提示清除放射所产生的ROS可能是肿节风防护腮腺放射损伤的主要机制；而电离辐射则可能通过诱导腮腺细胞凋亡而致使腮腺受损，同时机体可能通过增殖代偿以修复损伤，使用肿节风有助于降低凋亡率，促进增殖修复，从而证明肿节风具有良好的腮腺放射损伤防护作用。【意义】本研究结果为头颈部肿瘤放疗提供了一种有效的唾液腺放射防护剂，为放疗副反应的防治开辟了新的研究领域。