基于DPC4的蝙蝠葛酚性碱抗胰腺癌分子调控机制研究
结题报告
批准号:
81173599
项目类别:
面上项目
资助金额:
57.0 万元
负责人:
周忠光
依托单位:
学科分类:
H3210.中药抗肿瘤药理
结题年份:
2015
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
白云、苏慧、苏云明、刘萍、刘大伟、贾博宇、魏铁花、王静怡、刘旭
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中文摘要
胰腺癌是一种恶性程度很高的肿瘤。从中药中寻找多靶点、多效应、毒副作用小的胰腺癌治疗药物是一种有效途径。前期工作证实,蝙蝠葛酚性碱对人胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠移植瘤具有抑制作用,并上调DPC4的表达。由此推测:蝙蝠葛酚性碱是通过上调DPC4的表达抑制胰腺癌。本研究拟采用RNA干扰技术建立稳定的DPC4沉默表达BxPC-3细胞株,并构建胰腺癌细胞和裸鼠移植瘤模型,以蝙蝠葛酚性碱干预,从体内和体外分别观察蝙蝠葛酚性碱对其生长增殖、转移和侵袭等特性的影响,并采用实时定量PCR和Western blot技术检测DPC4的表达,探讨蝙蝠葛酚性碱抗胰腺癌作用与DPC4表达的相关性;以基因芯片结合生物信息学技术,明确蝙蝠葛酚性碱抗胰腺癌作用中DPC4调控的下游靶基因和信号通路,阐明DPC4在蝙蝠葛酚性碱抗胰腺癌中的调控机制。本研究将明确蝙蝠葛酚性碱抗胰腺癌的作用靶点,并为研发抗胰腺癌中药新药奠定基础。
英文摘要
胰腺癌是一种恶性程度很高的肿瘤。从中药中寻找多靶点、多效应、毒副作用小的胰腺癌治疗药物是一种有效途径。前期工作结果表明,PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠移植瘤表现出明显抑制作用,并且可影响细胞凋亡、细胞增殖和侵袭转移相关基因和细胞因子(包括DPC4)的表达。为探讨蝙蝠葛酚性碱抗胰腺癌的分子调控机制进行如下研究:.一、为明确PAMD对胰腺癌的抑制作用,建立胰腺癌细胞和裸鼠移植瘤模型,以PAMD进行干预,测定BxPC-3细胞生长周期并绘制生长曲线;MTT法检测各组中BxPC-3细胞的增殖情况;比较各组瘤重和抑瘤率,电镜观察病理形态;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果表明,PAMD对胰腺癌具有较强的抑制作用,并可明显促进BxPC-3细胞的凋亡,并将细胞阻滞在G1期,进而阻止细胞DNA复制。.二、为探讨PAMD抑制胰腺癌作用与DPC4表达的相关性,利用RNA干扰技术成功建立DPC4沉默表达的BxPC-3细胞株,并建立胰腺癌细胞和裸鼠移植瘤模型,以 PAMD进行干预,测定BxPC-3细胞生长周期并绘制生长曲线;MTT法检测各组中BxPC-3细胞的增殖情况;比较各组裸鼠移植瘤的瘤重,光镜观察裸鼠移植瘤的病理形态;流式细胞术检测BxPC-3细胞和裸鼠移植瘤的细胞周期及细胞凋亡情况。结果表明,PAMD抑制胰腺癌作用与DPC4表达有关,PAMD抗胰腺癌作用的有效靶点之一为DPC4基因。.三、以BxPC-3细胞为研究对象,以 PAMD进行干预,以基因芯片技术结合生物信息学技术检测,结果表明PAMD能改变BxPC-3细胞多个基因的表达,并能显著影响多个与肿瘤生长、凋亡和免疫相关的信号通路。. 四、分别建立胰腺癌细胞和裸鼠移植瘤模型,以 PAMD进行干预,采用实时定量PCR和Western blot技术检测ERK信号通路和Hedgehog信号通路中关键基因和蛋白的表达水平。结果表明PAMD能够下调胰腺癌BxPC-3裸鼠移植瘤中Shh、Ptch1、Smo、Gli-1、Raf、MEK1、ERK1 mRNA及蛋白的表达,其抗胰腺癌的作用机制可能ERK通路和Hh信号通路有关。. 本研究将明确蝙蝠葛酚性碱抗胰腺癌的作用靶点,并为研发抗胰腺癌中药新药奠定基础。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2013
期刊:辽宁中医药大学学报
影响因子:--
作者:魏冬梅;尹钢;周忠光
通讯作者:周忠光
DOI:--
发表时间:2013
期刊:中国中医药科技
影响因子:--
作者:朴成玉;韩玉生;赵良友;周忠光
通讯作者:周忠光
DOI:--
发表时间:2013
期刊:中医药信息
影响因子:--
作者:李洋;张英博;贾博宇;周忠光
通讯作者:周忠光
DOI:--
发表时间:2013
期刊:黑龙江科学
影响因子:--
作者:周忠光
通讯作者:周忠光
DOI:--
发表时间:2014
期刊:中医药信息
影响因子:--
作者:仲丽丽;周忠光;尹丽颖
通讯作者:尹丽颖
补阳还五汤调控AD神经血管单元RAGE/LRP1受体系统的分子机制研究
  • 批准号:
    81373777
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    71.0万元
  • 批准年份:
    2013
  • 负责人:
    周忠光
  • 依托单位:
国内基金
海外基金