甘蓝SRK突变体的构建及其与SCR相互作用的单倍型特异性研究
结题报告
批准号:
30900986
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
21.0 万元
负责人:
高启国
依托单位:
学科分类:
C1506.蔬菜与瓜果生长发育
结题年份:
2012
批准年份:
2009
项目状态:
已结题
项目参与者:
任雪松、牛义、杨洋、张艳、苗明军
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中文摘要
SRK与SCR是甘蓝自交不亲和雌雄蕊决定因子,两者是受体与配体关系,两者间的作用具有单倍型特异性。本项目拟对SRK上决定其单倍型特异性的氨基酸序列和与SCR相互作用的氨基酸位点,首先采用重组技术构建不同单倍型SRK间重组体,用酵母双杂交技术和蛋白质相互作用体外检测两种方法检测SRK重组体与SCR之间的作用,以确定SRK上决定其单倍型特异性的氨基酸序列;其次采用突变技术用丙氨酸分别替代决定SRK单倍型特异性序列在不同单倍型SRK间不保守的氨基酸,构建SRK突变体,同样用上述两种方法检测SRK突变体与SCR之间的作用,探明SRK上与SCR相互作用的氨基酸位点;最后通过不同单倍型SRK氨基酸序列对比,揭示SRK序列多态性与SRK单倍型特异性之间的关系。本项目研究结果不仅对SRK与SCR相互作用机制的深入研究有重要的科学意义,也将为利用自交不亲和性创造芸薹属作物新的育种理论和方法奠定基础。
英文摘要
根据项目计划书,我们在项目执行的三年中完成了以下四个方面的工作:(1)以两种不同单倍型SRK和SCR为材料,在生物信息学分析基础上构建了SRK重组体,利用酵母双杂交技术和蛋白质相互作用体外检测技术证明SRK上两个超多变区域HV1和HV2共同决定SRK的单倍型特异性;(2)通过SRK同源序列比对,利用点突变技术构建了SRK突变体,通过酵母双杂交技术和蛋白质相互作用体外检测技术鉴定出SRKZQ的HV1和HV2区域内5个氨基酸参与了SRKZQ与SCRZQ相互作用;(3)通过SRK同源序列分子进化分析,证明SRK单倍型分化早于Brassica oleracea、Brassica rapa和Brassica napus物种的分化,通过甘蓝SRK分子进化和多态性分析证明氨基酸位点变异可以发生在整个HV1和HV2区域,该区域内正向选择位点变异的积累导致了SRK识别单倍型特异性改变,只有部分正向选择位点直接参与SRK与SCR相互作用;(4)在完成上述研究内容的同时,我们利用本项目建立的体系分析了SRK上与THL1作用的最小区域,证明ClassⅠ和ClassⅡ两类SRK胞内结构域间保守半胱氨酸的不同可能导致ClassⅠ类材料表现出强自交不亲和,ClassⅡ类材料表现出弱自交不亲和。此外,为分离SRK下游信号组成元件,利用双向电泳和质谱技术对自交不亲和甘蓝柱头内受自花和异花授粉诱导差异表达蛋白进行了分析,克隆了甘蓝EXO70A1基因并对其表达特性进行了研究,取得了许多富有意义的结果。. 已经发表与本项目相关的学术论文7篇,加上正在撰写的论文,可望达到10篇以上。本项目已经培养研究生3名,获重庆市自然科学二等奖1项。这些研究工作表明,我们即在内容上完成了项目计划书所要求的研究内容,也取得了项目计划书所预期的研究成果,并为今后的研究开辟了新的空间。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:--
期刊:作物学报
影响因子:--
作者:杨昆;高启国;YANG Kun1,2,*,**, ZHOU Yong-Xiang3,**, ZHANG He-Cu;2 Engineering Research Center of South Upl;Agri;3 College of Resources;Environments, Chongqing;4 College of Life Science, Jilin Normal University;5 Key Laboratory in Olericulture of Chongqin
通讯作者:5 Key Laboratory in Olericulture of Chongqin
DOI:--
发表时间:--
期刊:西南大学学报(自然科学版)
影响因子:--
作者:高启国;韦静宜;朱利泉;王小佳
通讯作者:王小佳
DOI:--
发表时间:--
期刊:园艺学报
影响因子:--
作者:高启国;孙梓健;韦静宜;朱利泉;王小佳
通讯作者:王小佳
DOI:--
发表时间:--
期刊:园艺学报
影响因子:--
作者:陈松;曾静;高启国;朱利泉;刘豫东;任雪松;王小佳
通讯作者:王小佳
DOI:--
发表时间:--
期刊:作物学报
影响因子:--
作者:韦静宜;高启国;任雪松;王小佳;李成琼;宋明;WEI Jing-Yi,GAO Qi-Guo * ,REN Xue-Song,WANG Xiao-J
通讯作者:WEI Jing-Yi,GAO Qi-Guo * ,REN Xue-Song,WANG Xiao-J
甘蓝MLPK与SERK1/3相互作用促进柱头排斥自花花粉分子机制研究
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    省市级项目
  • 资助金额:
    0.0万元
  • 批准年份:
    2024
  • 负责人:
    高启国
  • 依托单位:
国内基金
海外基金