油茶是我国重要的木本食用油料树种，茶油品质油料，但产量较低；针对此，本项目选择油脂合成的一个关键基因DGAT1，开展了系统研究，明确了油茶DGAT1基因可以显著提高种子含油率。研究结果为揭示油脂合成的分子调控具有重要科学意义，也为实现油茶定向分子育种奠定了重要科学基础。主要研究结果如下：（1）油茶DGAT1基因的克隆。以油茶良种‘华硕’发育中种子为材料，采用Illumina Hiseq 2000高通量测序平台技术进行转录组测序，获得65,536条Unigene，并发现2个DGAT1片段，氨基酸序列为240个氨基酸。基于此，利用RACE技术，克隆了油茶DGAT1基因的全长cDNA序列，长度为1893bp，包含1个1548bp的开放阅读框，编码515个氨基酸，5'UTR和3'UTR区分别为121bp和229bp。编码蛋白分子量为58.44 k Da。（2）油茶DGAT1基因的特征分析。通过Southern杂交检测基因组中仅含一个DGAT1拷贝；用基因枪法轰击洋葱表皮，确定该基因是在细胞膜和细胞质中表达。构建原核表达载体pET-30a-CoDGAT1，在加入1.0MIPTG，诱导1-4小时时，成功在大肠杆菌中成功表达CoDGAT1蛋白。（3）油茶DGAT1基因的表达及与油脂合成的关联分析。以筛选到的EF1a基因作为内参，研究了油茶DGAT1基因的表达模式。该基因在种子发育过程中有两个表达高峰期，分别是油脂合成初始期表达量的13倍和11倍；同一时期的花组织各部分表达量差异不显著（P＜0.05）；CoDGAT1的表达与油脂含量的关联度高达0.9494，证明DGAT1在油脂积累过程中起着重要作用。（4）油茶转基因拟南芥和烟草的功能解析。在野生型拟南芥中过量表达DGAT1基因，含油率提高9%，脂肪酸组成有改变，但不显著；转基因烟草中种子含油率提高3.5%，脂肪酸组成有改变，但不显著。可见，油茶DGAT1基因可以显著提高种子的含油率，但不能显著改变脂肪酸组成。（5）油茶DGAT2基因的克隆和基于油脂合成基因的标记开发。采用同源克隆方法获得了油茶CoDGAT2序列的全长cDNA，长度为1271bp，包含1002bp的开放可读框，编码333个氨基酸。基于转录组数据中的油脂合成基因，选择179个位点，开发了67个多态性标记，为鉴定油脂合成连锁的分子标记奠定了重要基础。