遗传性耳聋小鼠内耳毛细胞缺失的分子机制研究

该项目以稳定遗传的耳聋小鼠模型，包括Math1trhl/trhl（内耳毛细胞缺失致聋）和Pou4f3ddl/ddl（非综合征型耳聋）突变小鼠为研究对象，应用高通量2D-DIGE/MS蛋白质组学手段，分别建立了Math1trhl/trhl和Pou4f3ddl/ddl耳聋小鼠模型与野生型C57BL/6J小鼠的蛋白表达差异图谱，发现二者共有的蛋白表达差异点13个，Math1突变小鼠特异表达差异点71个，Pou4f3突变小鼠特异表达差异点85个。经质谱鉴定，结合前期USH1F的蛋白质组学结果，发现41种蛋白质在三种或者两种突变小鼠中共存表达差异；47种蛋白质在Math1突变小鼠中特异性表达差异，75种蛋白质在Pou4f3突变小鼠中特异性表达差异，60种蛋白质在USH1F突变小鼠中特异性表达差异。差异表达靶点进一步应用Ingenuity Pathway Analysis(IPA)生物网络分析和知识挖掘工具，建立了转录因子Math1,Pou4f3的下游靶点，构建了各自的分子通路以及二者及三者的交叉通路。项目针对分子通路中重要的靶点进行了Western验证，有望在此基础上，进一步确定耳聋分子机制，这将有助于研发听觉疾病的有效药物，改进诊断和治疗方法；Math1和Pou4f3突变小鼠，在人类耳聋遗传鉴定和分子特征方面亦可突出模型价值.