T淋巴细胞颗粒溶素（granulysin）表达的基因调控机制的研究

颗粒溶素（granulysin）存在于人类细胞毒性T淋巴细胞和NK细胞胞浆颗粒中，具有广谱的抗微生物和杀伤肿瘤细胞活性。我们已经证实STAT5参与调控颗粒溶素的表达，然而其调控机制未知。本项目发现，在CRL-2105和 CD4+ T细胞中，IL-2可诱导颗粒溶素表达并杀死肺炎隐球菌，这与原代CD4+ T细胞类似。在这两种细胞中，我们利用荧光素酶报告系统分析颗粒溶素基因上游的增强子活性，发现STAT5结合位点位于颗粒溶素转录起始位点上游18302和18177之间。此外，利用异源的SV40启动子进行研究，发现该增强子的活性与序列方向无关。染色质免疫沉淀（ChIP）和凝胶电泳迁移率实验（EMSA）发现STAT5具有有结合该增强子的能力，而突变STAT5结合位点则使该增强子活性丧失。在原代CD4+T细胞中，过表达一个显性负突变体DN STAT5a显著抑制IL-2激活的STAT5的增强子结合力和抗隐球菌的能力。本项目阐明T淋巴细胞颗粒溶素表达的基因调控机制，可以为临床上恢复HIV感染病人颗粒溶素的表达，进而抵抗微生物感染奠定科学理论依据。