银杏内酯Ｂ影响神经干细胞增殖分化过程中Mash1/Id2表达的变化及机制

研究显示银杏内酯B可能对神经干细胞的增殖和分化具有调控作用。本项目拟应用荧光定量PCR、Western blot等分子生物学技术，结合原位杂交和免疫细胞化学等形态学技术，在嗅脑毁损和毁损后注射银杏内酯Ｂ的大鼠，在体检测毁损后不同时相点大脑喙侧神经干细胞迁移流通道中神经分化调控因子Mash1和Id2的mRNA及蛋白表达水平的时空模式及变化规律。在此基础上，离体培养室管膜前下区神经干细胞，缺氧诱导其损伤，观察银杏内酯Ｂ对神经干细胞增殖和分化的调节作用。采用真核转染技术，增强和抑制Mash1和Id2的表达，检测神经干细胞增殖和分化的特征和数量，了解单一因子的作用。进一步运用免疫共沉淀和EMSA技术观察银杏内酯Ｂ是否通过影响Id2与E47蛋白结合从而抑制Mash1的作用。本项目的顺利完成将有助于阐明银杏内酯B在神经干细胞的分化调控机制中的作用，具有重要的理论意义和应用前景。