基于酶结构的化学－酶方法快速构建新生物碱库及其活性筛选研究

本项目旨在用仿生学的方法，基于异胡豆苷合成酶（strictosidine synthase, STR）以及它与异胡豆苷复合物的三维结构，合理设计其突变体，通过两步酶催化和"一锅法"反应快速构建一个氮杂育亨宾新生物碱库，并对其进行活性筛选研究。选取15个不同位置取代或氮杂的色胺（trypamine）衍生物与裂环马钱子（secologanin）在Ni-NTA固相载体上经异胡豆苷合成酶及其突变体生物催化Pictet-Spengler反应，耦合为异胡豆苷及其氮杂衍生物。所得中间体分别与过量的15个伯胺衍生物进行组合，经异胡豆苷糖苷酶（strictosidine glucosidase, SG）脱糖活化，随后在硼氢根离子存在下"一锅法"快速构建成百上千E环氮杂、A环氮杂或非氮杂新结构母核的含四个手性中心的氮杂育亨宾碱衍生物库，以用于抑制多药耐药及抗肿瘤活性筛选研究。