Hax1在腺病毒URE介导的基因表达抑制中的作用

腺病毒的主要晚期转录单位（MLTU）上共有5个poly A位点(L1到L5)，在病毒感染早期到晚期，L1-L5 polyA位点的使用率呈现一种转换的规律。在前期的实验中，我们利用串联的L1/L3模拟小基因研究发现，在L1位点上游存在一个RNA抑制元件，叫URE。缺失URE后可使模拟小基因polyA位点的使用呈现病毒晚期感染状态。最近，我们利用酵母三杂交技术发现，Hax1蛋白有可能是与URE元件特异性相互作用的蛋白分子，并且初步的功能检测结果显示Hax1有可能通过结合URE序列来引发基因表达抑制。为进一步明确Hax1在腺病毒生命周期中的作用。在本课题中，我们将通过建立Hax1-siRNA可调控细胞系以及绿色荧光及虫荧光素酶报告基因系统，着重研究Hax1与URE相互作用的特异性与可靠性，并检测Hax1在腺病毒早期及晚期感染过程中对多聚腺苷酸位点的使用是否存在确实的调控作用