生殖支原体MgPa抗原表位的鉴定及其在诊断方面的应用

生殖支原体（Mg）的粘附素蛋白(MgPa)是最重要的中和抗原，具有很强的免疫原性；Mg感染人体后MgPa能发生抗原变异而逃逸临床诊断；且MgPa与肺炎支原体（Mp）P1蛋白有较高的同源性。本研究利用噬菌体随机12肽库对MgPa的抗原表位进行鉴定，结合生物信息学软件预测分析MgPa 的T细胞和B细胞表位，将其分别与Mp P1蛋白进行同源性分析，选取多个Mg特异的优势抗原表位并构建原核表达系统，诱导表达含多个抗原表位肽段与凝血酶位点的重组蛋白，经凝血酶切割后分别获得单个的抗原表位肽段，以多聚赖氨酸为核心基质，采用碳二亚胺活泼酯法分子交联技术制备多抗原肽（MAP）；分别检测重组蛋白和MAP的免疫反应性，并制备相应的多克隆抗体，用斑点免疫层析试验和ELISA方法检测Mg抗原。旨在了解Mg感染免疫的分子机制及其抗原表位的生物学功能，为研制快速、特异、敏感的基于抗原表位的Mg感染早期诊断试剂奠定基础。