在牛痘病毒中构建U87-MG细胞cDNA文库并应用报告基因筛选文库中人类T细胞白血病病毒I型（HTLV-1）的受体

实验发现人类T细胞白血病病毒I型（HTLV-1）是通过葡萄糖转运基因1(Glut-1)以外的受体进入神经细胞U87-MG。为了发现该受体,本研究将在牛痘病毒中构建U87-MG的cDNA文库,并借助敏感的报告基因通过细胞-细胞融合反应筛选文库。将表达HTLV-1壳蛋白的细胞和表达cDNA文库并转染报告基因质粒的受体阴性细胞共培养,若细胞表面有HTLV-1受体表达,则两类细胞将发生融合并激活报告基因。从挑出的阳性细胞中获得的牛痘病毒用于下一轮筛选,经过HA/Myc生物素亲和柱;GFP阳性细胞挑选和HA/Myc磁性免疫珠三轮筛选后获得的末轮牛痘病毒克隆用HTLV-1壳蛋白介导的细胞-细胞融合反应测定,阳性克隆提取DNA后送序列测定,获得的基因即为HTLV-1特异性受体。通过体内外实验验证受体功能。该受体的发现将为我们进一步了解HTLV-1相关的神经系统疾病的发病机制提供理论依据。