单个胚泡蛋白质因子分泌与其基因表达分析及其胚胎发育功能意义的探讨

选择胚胎质量是提高胚胎着床率和保证其宫内正常发育的必要条件。本研究拟以发育正常、卵裂球对称的着床前A级单个胚泡为样品，应用灵敏的单抗酶标法结合化学发光试剂，对胚胎发育着床密切相关因子LeY寡糖、LIF、MMP9、HB-EGF等的蛋白质分泌进行检测，根据分泌水平不同将胚胎分成高、低两组并继续观察：1）荧光RT-PCR检测单个胚胎基因表达水平；2）胚胎体外培养观察其发育速度；3)通过体内外着床模型观察两组胚胎着床率；4）应用不同因子提高培养液中蛋白因子浓度，并观察胚胎发育速度及着床功能；5）RNAi后降低胚胎相应蛋白质因子分泌对胚胎发育着床能力影响。探讨胚胎蛋白质分泌与胚胎发育生理的关系，以寻找可能的胚胎发育着床的功能性指标，为鉴定分析早期胚胎发育质量提供一快捷、准确的检测方法，探讨胚胎早期发育的分子机理，为IVF-ET和动物的良种培育、繁殖方法的改进等生殖生物学与生殖医学研究有重要的意义。