南药春砂仁“和胃”物质基础及其分子机制的研究

南药春砂仁Amomum villosum Lour.具有化湿开胃，温脾止泻，理气安胎的功效，现代药理学研究发现具有抗炎、抗菌等作用。目前关于春砂仁药效物质基础的研究多涉及挥发性成分，但其非挥发性成分则鲜有报道，而且活性方面也都是提取物的药理实验，并且对其所含的单独的活性成分研究很少。课题组在项目的资助下,对春砂仁“和胃”物质基础及其分子机制进行了探索性的研究。项目基本按照项目计划书执行，在执行的过程中参考当时评审专家的意见着重增加了对阳春砂仁挥发油的化学成分以及其活性研究部分。项目前期主要进行的是化学部分的实验研究。分别采用各种色谱技术进行分离纯化，通过各种波谱数据鉴定得到6个化合物。此外还对砂仁挥发油成分的进行研究。项目后期主要进行生物药理实验部分。经过摸索，课题组建立了RAW246.7细胞的炎症模型。针对砂仁中6个单体成分进行RAW 264.7抗炎活性和并利用经pNF-κB-SEAP-NPT质粒转染的RAW 264.7巨噬细胞对NF-kB活性抑制研究，此外由于砂仁当中的非挥发性成分少且难以分离，我们适当的修正了提取方案，建立了一种新型的漂浮有机液滴凝固液相微萃取(SFOD-LPME)细胞捕获结合 GC-MS (SFOD-LPME-GC-MS)的方法用于分离。此方法可以筛选砂仁挥发油中的活性成分，并在活性实验中，通过比较对砂仁挥发油与正常细胞跟炎症细胞的相互作用，进而筛选出砂仁挥发油中抗炎活性成分。建立起的SFODLPME结合高效液相色谱法还可用于比较和评价砂仁中低丰度微量成分黄酮类化合物。SFOD-LPME-GC-MS法是一种适合中药生物活性成分筛选和分离得简单、快速、省力和可靠的方法。在实验过程中，我们通过文献调研发现阳春砂仁的挥发油含有萜类化合物，萜类化合物具有抗癫痫活性，因此我们还评价了阳春砂精油和其甲醇提取物的抗癫痫活性。在本项目的资助下，与砂仁的相关内容发表SCI论文一篇，参加学术会议一次，发表会议论文一篇，我们还将在研究砂仁过程中创建的分离方法、药理实验方法等手段运用到了对无患子，鹅掌藤，流苏金石斛等三种植物的研究当中，发表相关SCI论文五篇，中文核心期刊文章2篇，专利一项。