TRPV1- - 内耳感觉细胞吸收和聚集庆大霉素的可能通道

探讨瞬时受体电位1型辣椒素蛋白（TRPV1）在内耳感觉细胞吸收和聚集庆大霉素的作用。庆大霉素(GM)与Texas Red 在低温下形成偶合物GTTR。利用TRPV1基因为目的基因，构建大鼠TRPV1基因真核表达载体，用阳离子脂质体介导转染TRPV1基因入HEK239细胞，并进行转染效率鉴定，分别将转染和未转染细胞与GTTR共培养，观察和比较吸收GM的差异及其受TRPV1调节剂的影响；比较野生型和TRPV1基因敲除小鼠在GTTR鼓室内注射后内耳毛细胞吸收和聚集GM的差异；利用激光共聚焦显微镜，观察不同条件下（加不同的TRPV1调节剂），GTTR与新生小鼠椭圆囊斑共培养后毛细胞吸收GM的差异；利用膜片钳技术，比较不同浓度GM对TRPV1激动剂诱发的椭圆囊斑毛细胞电活动的影响。从而明确TRPV1受体能与庆大霉素特异性结合并帮助庆大霉素进入和聚集于内耳感觉细胞内，为庆大霉素耳毒性防治提供理论依据。