参环毛蚓金属响应蛋白转录调控的分子机制研究

据前期工作发现：广地龙药材重金属超标的重要原因之一是其原动物参环毛蚓的生理性重金属富集作用所致。欲从源头上解决这一难题，有必要对其生物富集过程及其调控机制进行深入研究。新近提出的含有保守序列的金属应答元件MREs存在的普遍性以及MREs与金属调节蛋白转录类因子结合的唯一性等支持证据，为系统研究参环毛蚓生物富集作用提供了实际可行的切入靶点。据此，本研究拟构建含有蚯蚓金属硫蛋白基因MREs启动子序列的荧光素酶报告基因质粒PGL3-MTp，导入参环毛蚓细胞，在不同重金属环境下进行基因诱导表达，通过蛋白印迹、分子检测技术，寻找参与wMTs表达调控的各转录因子，进而确认转录因子在MT蛋白表达的调控作用。为进一步制定限制其重金属离子富集或加速其排泄的策略提供直接的实验依据。本项目为控制药材重金属超标开辟了一条新途径，也为动物类中药品质研究提供了宽广的应用平台。