调控与干预ERα和p53状态对乳腺癌细胞凋亡影响的研究

p53是重要的抑癌基因，新近的体外研究表明p53能促进ERα表达、ERα与p53结合使p53抑癌功能失活。在体内ERα与p53是怎样的相互作用机制？加入干预因素是否增强细胞凋亡效果？解明这些问题可能给临床治疗带来重大影响？本研究采用RNAi和转染技术调控体内、外乳腺癌细胞ERα及p53状态，并使用重组人p53腺病毒（rAd-p53）和他莫昔芬（TAM）对调控后状态进行干预，分析ERα和p53在自然或干扰情况下对细胞凋亡的影响。本研究旨在通过调控ERα、p53状态及药物干预，阐明ERα与p53在体内的相互作用机制；观察rAd-p53干预不同ER状态对乳腺癌细胞凋亡的影响，为rAd-p53个体化治疗提供依据；探讨TAM干预是否具有增强内源性p53及rAd-p53抑癌功能的作用，为乳腺癌的综合治疗（内分泌联合基因疗法）提供依据。

P53是重要的抑癌基因，有研究表明ERα（雌激素受体α）与p53存在相互作用机制。肿瘤基因治疗药物Ad-p53（重组人p53腺病毒注射液）治疗乳腺癌存在无效病例，是否与ERα与p53相互作用有关？方法：实验采用western blot检测技术，观察不同浓度（感染复数）、不同作用时间rAd-p53对乳腺癌MCF-7细胞ERα状态的影响。结果： 不同Ad-p53浓度（0、1、10、100、1000、10000 MOI)处理MCF-7细胞 48h后，结果显示10-100 MOI ER表达存在高峰。调整Ad-p53浓度(0、10、30、50、80、100 MOI)，处理48h后，结果显示0-80 MOI ER及p53表达逐渐增加，80-100 MOI p53表达继续增加，ER明显减少。继续相同Ad-p53浓度(0、10、30、50、80、100 MOI)，处理时间缩短为24h，ER表达趋势相同，但在各浓度下，ER表达量均减少。结论：在Ad-p53感染复数在一定范围内（在0-100MOI）,ER表达量随着Ad-p53感染复数的增加而增加，当超过这一范围ER表达逐渐下降.且48小时为Ad-p53作用高峰。综上，Ad-p53能够促进乳腺癌ERα的表达, 但随着ERα表达增加，p53与ERα相互制约关系使ERα表达得到抑制而逐渐下降。 本研究从体外实验证实了Ad-p53与乳腺癌细胞ERα存在相互作用关系，在今后实验中有望通过调节ERα状态找到Ad-p53个体化治疗乳腺癌的理论依据。

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