缺氧诱导因子1对p53RFP基因的转录调控机制及效应

转录因子HIF-1是参与缺血性心血管病的重要基因，具有独特的调控血管新生机制，其调控生成的血管优于曾试用于临床的VEGF等基因。我们前期研究表明HIF-1表达增加时，p53RFP的核酸和蛋白表达均增加。p53RFP是调控细胞增殖与细胞周期的重要基因。为深入探索这一新发现，我们在生物信息学分析基础上，克隆了人p53RFP基因启动子区部分序列进行分析，发现-1～-697bp区域启动子活性高，EMSA也初步确定该区域存在HIF-1结合位点。为此，我们拟构建含潜在HIF-1核心结合位点、不同长度的p53RFP启动子截短片段报告载体系统，分析其活性变化；应用EMSA、ChIP等技术对HIF-1 调控元件进行鉴定；采用基因转染和RNAi技术，分析HIF-1上调或调低对p53RFP 基因启动子活性和表达的影响。以期阐明HIF-1对p53RFP的转录调控机制及效应，探索HIF-1调控血管新生的独特机制。