脊柱结核血清、尿液中特异循环miRNA标记物的筛选验证及其在成骨细胞分化中的调控机制研究
批准号:
81660370
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
37.0 万元
负责人:
王自立
依托单位:
学科分类:
H0606.骨、关节、软组织感染
结题年份:
2020
批准年份:
2016
项目状态:
已结题
项目参与者:
师志云、马小民、崔立强、马文鑫、孙宇航、袁虎成、孙国良、宋向伟
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中文摘要
脊柱结核病的临床表现、影像学改变、实验室检查的诊断作用有限,尚无具有特异性的分子生物学检测方法。基于近年全球miRNA研究的重大发现,很有必要进行血清、尿液中差异表达的循环miRNAs作为诊断脊柱结核病特异性生物标记物的研究。我们前期研究已从血清中筛选出了与脊柱结核最为贴近的差异表达的hsa-miR-30c-5p;并在尿液中成功分离、提取了循环miRNA。本研究拟计划完成:脊柱结核血清、尿液中差异循环miRNA的筛选、临床验证及靶向调控通路验证;hsa-miR-30c-5p的靶向性验证;血清、尿液中循环miRNA标记物灵敏度、特异度及二者的相关性分析。经上述研究,力图确立血清或/和尿液中相关循环miRNA可作为脊柱结核诊断的特异性生物标记物,明确hsa-miR-30-5p在成骨细胞分化中的调控机制。从而为脊柱结核病的精准诊断提供一个新方法,并为治疗、疗效评价等方面的研究提供理论基础。
英文摘要
The role of the diagnosis for spinal tuberculosis by clinical manifestations , radiographic changes and laboratory tests are limited, and there is no specific molecular biology detection.Based on global miRNA research discovery in recent years, it is necessary to study the circulating miRNAs differentially expressed in serum and urine which can be as a specific biological markers to diagnosis spinal tuberculosis. In our previous study, we have screened out a miRNA named hsa-miR-30c-5p which is found in the serum and it’s also the most close to spinal tuberculosis , and we have successfully completed the separation and extraction of circulating miRNA in the urine. This study intends to plans to complete the following goals : the screening, clinical validation,and regulatory pathway targeted verification about differentially circulating miRNA in serum and urine of spinal tuberculosis’; targeted verification about the hsa-miR-30c-5p; analysis the sensitivity and specificity of circulating miRNA markers in serum and urine and also the correlation Through the above study, we are trying to establish the associated circulating miRNA in serum and / or urine which can be used as biomarkers to diagnosis spinal tuberculosis ,and to make clear about the mechanism of hsa-miR-30-5p’sregulatory in osteoblast cell differentiation .So as to provide a new method for accurate diagnosis of spinal tuberculosis, and provide a theoretical basis for the treatment and evaluation of therapeutic effect.
脊柱结核病的临床表现、影像学改变、实验室检查的诊断作用有限,尚无具有特异性的分子生物学检测方法。在本研究中首先使用 miRNA基因芯片对脊柱结核和正常健康人的血浆miRNA以及尿液外泌体miRNA进行高通量筛选。然后使用RT-qPCR技术对部分芯片筛选结果进行了三个阶段四个队列的大样本验证,最终得到对于脊柱结核具有诊断价值的一组miRNA。以上述差异miRNA为切入点,对结核杆菌侵染成骨细胞后通过hsa-miR-543靶向调控RANKL表达的机制进行了初步研究。研究发现:联合脊柱结核患者血浆hsa-miR-506-3p,hsa-miR-543、hsa-miR-195-5p作为脊柱结核的诊断模型,其敏感性=80.5%,特异性=80.0%;联合脊柱结核患者尿液外泌体hsa-let-7f-5p、hsa-miR-4768-3p、hsa-miR-4437、hsa-miR-381-5p作为脊柱结核的诊断模型,其敏感性=91.1%,特异性=84.3%;H37Ra pMV261-GFP荧光菌株转染入成骨细胞后会降低hsa-miR-543的表达从而促进RANKL蛋白的表达。本研究最终各筛选出一组脊柱结核血浆miRNA和尿液外泌体miRNA诊断标记物,两者均具备成为脊柱结核的特异性诊断标记物的潜力。并初步明确了结核杆菌侵入成骨细胞后,通过降低hsa-miR-543的表达,从而促进RANKL表达以促进破骨细胞活化的机制。
期刊论文列表
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Five-year outcomes of posterior affected-vertebrae fixation in lumbar tuberculosis patients.
腰椎结核患者后路受影响椎体固定的五年结果
DOI:10.1186/s13018-018-0902-2
发表时间:2018-08-22
期刊:Journal of orthopaedic surgery and research
影响因子:2.6
作者:Liang Q;Wang Q;Sun G;Ma W;Shi J;Jin W;Shi S;Wang Z
通讯作者:Wang Z
The outcome of intervertebral surgery in the treatment of lumbar tuberculosis in children: A case series and long-term follow-up
椎间手术治疗儿童腰椎结核的疗效:病例系列及长期随访
DOI:10.1097/md.0000000000014815
发表时间:2019-03-01
期刊:MEDICINE
影响因子:1.6
作者:Liang, Qiang;Pu, Yu;Wang, Zili
通讯作者:Wang, Zili
pRNA-3WJ为载体的纳米微粒的构建及在脊柱结核靶向沉默结核杆菌Mce4A基因作用的研究
- 批准号:81460336
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:49.0万元
- 批准年份:2014
- 负责人:王自立
- 依托单位:
超短程化疗治疗脊柱结核的基因表达谱评价的前瞻性对比研究
- 批准号:81260282
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:55.0万元
- 批准年份:2012
- 负责人:王自立
- 依托单位:
复合三联抗痨药的硫酸钙/氨基酸聚合物缓释植骨材料的实验研究
- 批准号:81060149
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:27.0万元
- 批准年份:2010
- 负责人:王自立
- 依托单位:
国内基金
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