附睾特异新蛋白酶抑制剂ESC6的表达特性和功能研究

附睾是精子成熟和储存的场所，也是男性避孕的理想靶器官。深入对附睾特异表达的基因的研究有助于揭示精子在附睾中成熟的分子机制，为临床男性不育的诊断治疗以及男性避孕药开发提供适当的靶点，取得原创的自主知识产权。在精子成熟过程中许多精子蛋白发生酶解加工，蛋白酶和蛋白酶抑制剂的平衡起很重要的作用。ESC6是附睾特异的KAZAL型丝氨酸蛋白酶抑制剂（SPINK）家族的新成员，前期工作发现它在人，猴，大鼠，小鼠都存在。本项目准备从mRNAs水平上研究ESC6的表达特性，制备抗体用免疫组织学方法研究该蛋白在组织中的细胞定位及是否与精子结合，表达活性蛋白并在体外分析对一系列蛋白酶的抑制功能，继而用在体RNA干扰的方法下调ESC6的表达并观察表型。通过mRNA水平和蛋白水平研究相结合，体外和体内研究相结合，确定ESC6的生理功能，为下一步开发男性避孕药和男性不育的诊断治疗提供新的靶点和线索。