ClICR/mPTP/mCICR通路介导心肌缺血再灌注损伤及其机制研究

他人及我们前期工作提示Cl-诱发Ca2+释放(ClICR)机制可能是Cl-内流介导心肌缺血-再灌注(I/R)损伤又一重要机制。本研究拟从mPTP所介导的线粒体Ca2+流出促Ca2+释放（mCICR）等深入探讨心肌I/R损伤时Cl-内流与细胞内Ca2+超载的内在联系。采用P19CL6心肌细胞株，应用基因转染和RNAi技术分别上调和沉默mPTP功能蛋白即电压依赖性阴离子通道1（VDAC１）基因，在缺氧/复氧损伤以及无Ca2+或无Cl-等不同情况下，观察线粒体膜电位（ΔΦm）、ROS系统活性、mPTP开放、胞内Ca2+及Cl-浓度变化及相关功能指标；应用VDAC１shRNA慢病毒载体，建立VDAC１基因沉默大鼠模型，在I/R损伤时，进一步确证和阐明心肌损伤时ClICR/mPTP/mCICR通路在介导胞内钙超载中的重要作用。为探索心肌细胞急性损伤时分子生物学机制，寻找新的药物作用靶点拓展新的思路。