课题基金基金详情
利用GAL4/UAS系统研究家蚕发育基因BmRYBP及BmRing的生物学功能
结题报告
批准号:
31302035
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
24.0 万元
负责人:
张美蓉
依托单位:
学科分类:
C1709.养蚕学
结题年份:
2016
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
张业顺、张国政、余俊杰、童亮亮、刘丽丽、韩新香
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
客服二维码
微信扫码咨询
中文摘要
Ring和RYBP是高度保守的调控蛋白,Ring参与组蛋白H2A泛素化作用,引起基因沉默和X染色体失活,异常表达导致癌变。RYBP能与Ring通过相同的C端结构域结合,行使转录抑制功能,在发育过程中调控Hox基因的沉默表达。同时GAL4/UAS转基因方法广泛应用于基因的功能研究,为很多领域的研究工作铺平了道路。本研究以鳞翅目昆虫的代表家蚕为研究对象,克隆家蚕Ring和RYBP基因,建立适合家蚕研究的GAL4/UAS转基因系统,结合表达分析、免疫沉淀和酵母双杂交技术等鉴定基因的功能。根据我们前期工作结果和文献报道,采用GAL4/UAS转基因研究方法,建立由A4、FibL和3xP3启动子分别启动的家蚕Ring和RYBP基因的GAL4/UAS转基因超量和干涉表达品系,获得突变表型、个体检测及Hox家族基因的表达分析,阐明家蚕Ring和RYBP在有关组织(器官)发育调控中的生物学功能。
英文摘要
Ring and RYBP are the highly conservative regulation proteins.The Ring mediates the monoubiquitination of histone H2A,causing gene silencing and the X chromosome inactivation. Its abnormal expression leads to cancer.RYBP and Ring can bind together by the same structure of C domain,inhibiting transcription,silencing of Hox genes expression during development.Meanwhile, GAL4/UAS system widely used to the genic function study and facilitated the research in many fields.Silkworm as Lepidoptera insects typifying is our research object.We cloned the BmRing and BmRYBP in silkworm bombyx mori. We established the GAL4/UAS transgenic system which is suitable for functional study in silkworm,combining expression analysis,immune precipitation and yeast two-hybrid system,to identify the function of BmRing and BmRYBP.According to our prophase study and the reported documents,we used the transgenic methods of specific promoter priming GAL4/UAS.We establish the GAL4/UAS transgenic strains that rely on the generation of activator transgenic excessive and interventional expression lines of BmRing and BmRYBP.The GAL4 expression is under control of the A4,FibL and 3xP3 promoters.Obtaining and detecting the mutation phenotype,Hox family gene expression analysis,claritying the biological function of BmRing and BmRYBP in silkworm.
Ring和RYBP是高度保守的调控蛋白,RYBP参与组蛋白H2A泛素化作用,引起基因沉默和X染色体失活,异常表达导致癌变。RYBP能与Ring通过相同的C端结构域结合,行使转录抑制功能,在发育过程中调控Hox基因的沉默表达。同时GAL4/UAS转基因方法广泛应用于基因的功能研究,为很多领域的研究工作铺平了道路。本研究以鳞翅目昆虫的代表家蚕为研究对象,克隆了家蚕BmAntp、BmRing和BmRYBP基因、获得了它们的DNA和蛋白质序列信息、组织表达特征和BmRing潜在的相互作用蛋白;制备了BmAntp、BmRing和BmRYBP的抗体;建立适合家蚕研究的GAL4/UAS转基因系统,在家蚕中实现了BmAntp和BmRYBP的转基因干涉;通过对转基因干涉BmRYBP,造成胚胎致死、幼虫腹足和成虫翅膀发育畸形,阐述了BmRYBP的生物学功能,为其它鳞翅目昆虫的RYBP功能研究提供了参考,提供了通过敲除鳞翅目害虫RYBP基因,控制害虫数量,降低农药使用,保护生态环境;通过对转基因干涉家蚕BmAntp,延长了家蚕食桑时间,增加了蚕茧重量,进一步研究这一现象的生物学本质,为以后通过转基因基因育种,实现蚕业生产增产增效提供了可能。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:--
期刊:蚕业科学
影响因子:--
作者:张美蓉;许平震
通讯作者:许平震
DOI:--
发表时间:2017
期刊:蚕业科学
影响因子:--
作者:张美蓉;许平震;夏庆友
通讯作者:夏庆友
DOI:--
发表时间:2016
期刊:International Journal of Genomics
影响因子:2.9
作者:罗旭芳;许平震;杨建华;徐安英
通讯作者:徐安英
国内基金
海外基金