miRNA与水稻种子活力的相关性研究

基于前期对水稻种子老化的生理机制研究以及最近通过Real-time PCR初步检测到水稻种子胚中miR164、miR168和miR172等的表达随种子活力的下降而呈现规律性变化的实验结果，申请本项目研究：（1）从具不同活力的水稻种子中分别提取miRNA,运用miRNA microarray、Real-time PCR和RNA杂交，筛选和鉴定与水稻种子活力相关的miRNA；并通过生物信息学分析，获得其靶基因；（2）构建种子活力相关pre-miRNA及其靶基因的同义突变过表达载体，转导入水稻，获得转基因水稻种子，运用RNA杂交和Western blot分析，进一步验证miRNA与靶基因表达之间的关系和与水稻种子活力的相关性。通过本项目研究，从一个新的角度探讨种子活力的分子调控机制，并为今后通过遗传操纵手段调控种子中miRNA的表达水平，改良水稻种子和其他植物种质资源的贮藏特性建立技术平台。