益气提升法通过LTBP-4上调Fibulin-5表达、影响脱垂性痔组织中弹性纤维活性的研究
批准号:
82074442
项目类别:
面上项目
资助金额:
56.0 万元
负责人:
孙锋
依托单位:
学科分类:
中医外科学
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
孙锋
中文摘要
在益气提升法治疗脱垂性内痔取得良好临床疗效的基础上,本研究应用分子生物学研究的手段,测定不同脱垂程度的内痔标本中Fibulin-5、LTBP-4和弹性纤维相关ECM和SLRP相关基因的mRNA及蛋白的表达水平,通过研究不同程度脱垂性内痔组织中Fibulin-5、LTBP-4和弹性纤维相关的表达差异,探究Fibulin-5与脱垂性内痔的发生、发展的内在关联性,并进一步通过分析弹性纤维的表达差异、解释潜在的分子生物学机制。同时,本研究应用临床分析研究和分子生物学研究的手段,在补中益气颗粒干扰后的内痔组织成纤维细胞中,通过RRT-PCR,WB和免疫荧光染色等方法,检测Fibulin-5和LTBP-4分别过表达或敲除后,不同组分和不同治疗手段下,相关基因的表达变化,深入研究益气提升法治疗脱垂性内痔的作用
英文摘要
On the basis of ideal clinical efficacy of prolapsed internal hemorrhoids by Tonifying Qi, to test the expressions of mRNA and protein of Fibulin-5、LTBP-4、elastic fiber related ECM、SLRP related genes by applying the research technique of molecular biology and study the expression differences in different degrees of prolapsed internal hemorrhoid samples, to reveal the relationship between the Fibulin-5 and the occurrence and development of prolapsed internal hemorrhoids, then to analysis the elastic fiber related expression differences and explain the possible molecular biology mechanisms in this study. At the same time, to test the related genes’ expression changes in different groups and treatments after the over-expressing or or knockout of Fibulin-5 and LTBP-4 in the fibroblasts intervented by Bu Zhong Yi Qi Granules by use of RT-PCR, WB and Immunofluorescence staining with the help of research methods of clinical analysis and research and molecular biology for disclosing the mechanism of treating prolapsed internal hemorrhoids by Tonifying Qi. The aim of this study is to find the Molecular biological proofs for the theory of distal displacement of the anal cushions, and provide scientific evidences for treating prolapsed internal hemorrhoids.
痔疮病是一种常见的胃肠道疾病,由肛垫支持组织的退化引起,影响了相当一部分人群;然而,其潜在的致病机制仍然不甚清楚。本研究旨在阐明Fublin-5(FBLN5)和潜在转化生长因子β结合蛋白4(LTBP-4)在成纤维细胞激活中的作用及其对痔疮病进展的综合影响,同时识别潜在的治疗靶点以改善治疗效果。通过在肛门周围注射冰醋酸建立了痔疮病的大鼠模型,并采用多种方法评估成纤维细胞活性,包括迁移的划痕实验、蛋白表达分析的西方印迹法和基因表达水平的实时PCR。研究结果显示实验组痔疮组织结构发生明显变化,同时FBLN5、LTBP-4、α-SMA、胶原蛋白1型和3型以及纤维连接蛋白的表达显著下降。痔疮来源的原代成纤维细胞表现出迁移能力降低和与组织愈合相关的关键蛋白和基因表达减少。值得注意的是,成纤维细胞中FBLN5的过表达改善了细胞活力和运动能力,突显了其在维持成纤维细胞功能中的关键作用,而LTBP-4的上调进一步促进了成纤维细胞的活性。此外,对FBLN5过表达和LTBP-4敲低的研究确认了FBLN5的有益作用是通过LTBP-4介导的。总体而言,这些结果强调了FBLN5和LTBP-4在成纤维细胞激活中的重要性及其作为新型治疗靶点以增强痔疮病治疗效果的潜力。
益气提升法对脱垂性内痔组织抗衰老蛋白Fibulin家族表达的影响研究
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批准号:81302976
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项目类别:青年科学基金项目
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资助金额:23.0万元
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批准年份:2013
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负责人:孙锋
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依托单位:
国内基金
海外基金