组蛋白去乙酰化酶抑制剂协同芬维A胺治疗肝癌的研究

本项目致力于阐明维甲酸受体β (RARβ)、 Nur77及其两者之间相互作用在组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HCACi)和芬维 A 胺诱导肝癌细胞凋亡中的作用和分子机制，目前已基本完成预期目标，并适当延伸。主要研究成果如下：1. 研究已证实组蛋白去乙酰化酶抑制剂能逆转肝癌细胞对芬维A胺的耐受并且能显著增强芬维A胺诱导人肝癌细胞凋亡，这一协同的凋亡效应与组蛋白去乙酰化酶抑制剂和芬维A胺诱导RARβ、Nur77表达及促使其由细胞核移位致线粒体有关，通过siRNA、coimmunoprecipitation和confocal等技术证实Nur77出核介导的凋亡途径在组蛋白去乙酰化酶抑制剂协同芬维A胺诱导肝癌细胞凋亡作用中起了重要的作用，研究也发现Nur77蛋白表达与RARβ蛋白有直接关系，而其mRNA表达与RARβ无关，提示组蛋白去乙酰化酶抑制剂和芬维A胺诱导肝癌细胞凋亡过程中RARβ能稳定Nur77蛋白并促使其出核诱导凋亡；2. 研究发现ERK1/2通路与芬维A胺诱导人肝癌细胞凋亡密切相关， ERK的异常激活与肝癌细胞内Nur77介导的凋亡途径受阻及肝癌细胞株耐受芬维A胺有关，ERK1/2是芬维A胺-Nur77介导的肝癌凋亡途径的关键调节通路（见已发表的论文Biochemical Pharmacology. 2011;81:910-6）。在相关扩展领域，本项目还发现：长链非编码RNA （long non-coding RNA, lncRNA）uc002mbe.2在肝癌组织和多株肝癌细胞系中显著下降，但组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA能特异性诱导uc002mbe.2表达，敲除uc002mbe.2能显著降低TSA的凋亡效应，并且能促进肝癌细胞增殖。由此我们推测：uc002mbe.2是一个新的、有抑制肝癌作用的lncRNA，其在肝癌中表达下降与组蛋白乙酰化调控紊乱有关。这些研究为肝癌基因治疗提供了潜在分子靶点。