MicroRNA对舌鳞癌侵袭转移的调控作用研究

本项目以临床上头颈恶性肿瘤化疗一线药物顺铂，诱导建立了舌鳞癌细胞株CAL27、SCC25的耐药细胞株CAL27-res、SCC25-res，采用miRNA芯片技术，初步分析了舌癌细胞与舌癌顺铂耐药细胞miRNA 表达谱的差异，并以qRT-PCR进行验证，发现耐药细胞中miR-200b和miR-15b表达下调最明显，而且细胞与细胞之间连接消失，呈现间质表型，E-cadherin表达下调，Vimentin，N-cadherin表达上调，侵袭迁移能力增加。而升高miR-200b或miR-15b表达，CAL27-res和SCC25-res细胞的间质特性被逆转，侵袭迁移能力降低，对顺铂敏感性增加；同时高表达miR-200b和miR-15b，作用更明显。敲低miR-200b或miR-15b，CAL27和SCC25向间质表型转化，侵袭迁移能力增加，对顺铂的抗性增加。miR-200b和miR-15b的靶基因BMI1在CAL27-res细胞中表达升高，高表达miR-200b或miR-15b，BMI1表达降低，荧光素酶活性也降低。CAL27-res移植瘤在小鼠体内发生肝肺转移，而CAL27移植瘤无转移，高表达miR-200b或miR-15b，显著抑制CAL27-res移植瘤的转移能力，而对移植瘤的生长无明显影响。与化疗敏感的舌鳞状细胞癌样本相比，化疗抗性的肿瘤样本中，miR-200b和miR-15b表达低，BMI1表达高；BMI1表达与miR-200b或miR-15b的表达负相关；miR-200b或miR-15b表达水平与病人发生淋巴结转移，对化疗的抗性负相关，而BMI1表达水平与病人发生淋巴结转移，对化疗的抗性正相关。Kaplan-Meier法和log-rank检验分析也表明，miR-200b或miR-15b表达水平高的病人总生存率高于表达低的病人，而BMI1表达水平低的病人总生存率高于表达高的病人。. 对照研究工作计划，我们已经完成预定的研究内容，并达到预期成果，在国内外重要刊物上发表了研究论文，SCI论文方面，《Oncogene》发表1篇，中文核心期刊发表2篇。人才培养方面，已培养博士研究生1名（孙丽娟），硕士研究生1名（林钊宇）。