课题基金 / 基金详情

SP-A对感染MO的盘羊杂交羊治疗效果及机制探索

批准号:
32060133
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
35.0 万元
负责人:
孙延鸣
依托单位:
学科分类:
实验动物学
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
孙延鸣

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
绵羊支原体肺炎对养羊业危害严重,临床上缺乏治疗该病的特效药,研制该病特效药,必须完成临床药物疗效实验,其中建立该病的疾病模型是迫切需要解决的问题。肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)是一种亲水性糖蛋白,在促进宿主肺部先天性防御肺炎支原体感染过程中发挥了重要作用。本研究以绵羊SP-A为研究对象,以易感绵羊肺炎支原体(MO)的盘羊和巴什拜羊的杂交后代作为模型动物,通过筛选MO强毒株和回传易感羊获得含有MO强毒株的肺组织作为攻毒材料,接种盘羊杂交羊,建立MO人工感染模型,并通过行为学临床评分,肺脏病变评分,检测各项指标建立模型评价体系。在此基础上,研究SP-A对感染MO的盘羊杂交羊治疗效果,最佳治疗剂量、治疗时间,并探究SP-A在改善临床表现的同时,是否会改善肺部炎症、细胞因子过度表达引起的肺损伤、各脏器MO载荷量、免疫抑制,以期为SP-A在绵羊支原体肺炎的临床应用、治病机制研究提供基础与支持。
英文摘要
Mycoplasma pneumonia in sheep, a major infectious diseases without specific drug in clinic, seriously harm the healthy development of sheep industry. For developing a specific drug used for treating this disease, clinical experiments on the evaluation of its therapeutic effect must be completed necessarily. In which, establishing animal disease models successfully is an important problem in urgent need of solution. Pulmonary surfatcant-associated protein A (SP-A), a kind of hydrophilic glycoprotein, plays an important role in promoting the innate defense of host’s lung against Mycoplasma ovipneumoniae (MO). SP-A is the research object of this study, argali hybrid lambs produced from parents of male Argali sheep and female Bashbay sheep are used to establish models. In this study, in order to the establish artificial infection model of MO successfully, the virulent strain of MO sifted out is used to infect susceptible sheep, its lungs containing the virulent strain of MO are collected and used to infect subsequently. After that, the model evaluation system is established by behavioral clinical score, lung disease score and various indicators of detection. Aiming to provide the basis and support for the clinical application of SP-A in treating Mycoplasma pneumonia in sheep and its cure mechanism, the therapeutic effect of SP-A on argali hybrid lambs infected with MO, the best therapeutic dose and time are studied on this basis. In addition, the questions whether lung inflammation and lung injury caused by over expression of cytokines will be relieved, whether the load of MO will reduce and whether immunodepression will be decreased while improving clinical performance are explored.
绵羊支原体肺炎对养羊业危害严重,临床上缺乏治疗该病的特效药,研制该病特效药,必须完成临床药物疗效实验,其中建立该病的疾病模型是迫切需要解决的问题。本项目通过筛选强毒株,建立MO发病模型,评价SP-A对发病模型的治疗效果,取得了以下成果:.1.通过细胞黏附、鸡胚感染实验,从12株MO菌株中筛选出毒力较强菌株XJ15。将强毒株XJ15复壮后,在湖羊体内回传3代后,选取病健交界处肺组织研磨过滤,滤液以气管注射的方法感染盘羊杂交羊(感染剂量2.32×10^6 copies)。中高剂量的组织毒感染,可引起盘羊杂交羊完全发病,出现体温升高,精神沉郁,腹泻等症状,临床症状评分大于2分以上,DR检查评分大于21以上。感染29 d后,肺组织中MO拷贝数为1.8×10^5/mL。经4-5次感染实验,MO感染初期体温升高,感染中随机鼻拭子拷贝数在1.0×10^6copies/mL左右时,感染羊临床症状显著,肺尖叶肝样病变。使用含有MO XJ15拷贝数为1.8×10^5以上组织强毒攻毒,可成功建立绵羊支原体肺炎发病模型。此外,MO感染盘羊杂交羊后,可刺激宿主的IgA、IgG、IgM水平升高,NF-κB、IL-1β、IL-17和IL-18表达水平上升,CD4浓度降低,CD8浓度升高,使宿主的细胞免疫与体液免疫功能出现异常。.2.在毕赤酵母中成功表达绵羊rSP-A蛋白,Ni柱纯化获得rSP-A蛋白。利用组织毒再次感染盘羊杂交羊,建立发病模型,使用rSP-A蛋白治疗发病模型动物,同时设立了加米霉素治疗组,治疗组羊没有死亡,未见发烧;与对照组相比,治疗组羊临床评分较低,DR检查评分较低;rSP-A和加米霉素处理抑制体内NF-κB、IL-1β、IL-6、IL-17、IL-18和TNF-α分泌水平,抑制NF-κB p65蛋白磷酸化水平。治疗抑制绵羊体内IgA、IgG、IgM,促进 sCD4分泌。rSP-A和加米霉素处理增加体内白细胞、淋巴细胞和粒细胞总数,rSP-A蛋白有助于肺部MO清除,SP-A治疗效果稍逊于加米霉素。总之,SP-A对于治疗MO感染有良好效果。.该项目实施期间,在核心刊物发表学术论文9篇,其中SCI论文1篇,申报国家发明专利1项,培养2名硕士研究生,培养青年教师1名。MO感染发病模型成功建立,具有较好的应用价值,SP-A治疗MO感染具有较好的效果,有望推广应用。
盘羊及其杂交羊SPLUNC1特性研究及抗肺炎支原体差异表达基因的筛选
  • 批准号:
    31460686
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    50.0万元
  • 批准年份:
    2014
  • 负责人:
    孙延鸣
  • 依托单位:
BPI在盘羊及其杂交后代抗支原体肺炎的作用机理研究
  • 批准号:
    31160525
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    54.0万元
  • 批准年份:
    2011
  • 负责人:
    孙延鸣
  • 依托单位:
类泛素ISG15在盘羊、巴什拜羊及其杂交种的疾病抗性研究
  • 批准号:
    31060351
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    26.0万元
  • 批准年份:
    2010
  • 负责人:
    孙延鸣
  • 依托单位:
国内基金
海外基金