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幽门螺杆菌Lpp20的H-2d限制性Th表位的鉴定及其免疫学特性的研究
结题报告
批准号:
31070119
项目类别:
面上项目
资助金额:
34.0 万元
负责人:
李妍
依托单位:
学科分类:
C0108.病原细菌学
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
龙敏、罗军、马强、陈瑶、高洋、劳海苗、何殿殿
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中文摘要
目前对幽门螺杆菌感染的免疫机制研究表明, 机体的CD4+T细胞而非CD8+T细胞对H.pylori 感染的免疫保护作用是十分重要的。Lpp20 是H.pylori入侵宿主后可诱导机体产生保护性免疫反应的重要抗原之一,鉴定其Th表位并研究其特异性的T细胞免疫应答特征具有重要的生物学意义和潜在的应用价值。本课题以BALB/c小鼠为模型,首先采用生物信息学预测Lpp20的H-2d限制性的Th表位,体外固相合成表位肽,然后结合CD4+T淋巴细胞功能实验、MHC限制性分析、ELISA等方法确定其Th表位并分析其免疫学特性。在此基础上,将筛选出的Th表位和已鉴定的一个Lpp20的B细胞表位串联并在E.coli中表达,免疫BALB/c小鼠,分析其所引起的细胞和体液免疫反应,对其免疫原性的在体有效性进行初步验证,为研究Lpp20 在H.pylori感染中的免疫保护作用及表位疫苗的设计提供实验依据和奠定基础
英文摘要
目前对幽门螺杆菌(H.pylori)感染的免疫机制研究表明, 机体的CD4+ T细胞(Th细胞)在H.pylori 感染的免疫保护机制中起着十分重要的作用。 Lpp20 是H.pylori入侵宿主后可诱导机体产生保护性免疫反应的重要抗原之一,鉴定其Th细胞表位并研究其特异性的T细胞免疫应答特征具有重要的生物学意义和潜在的应用价值。本课题以BALB/c小鼠为模型,采用生物信息学软件SYFPEITHI预测了8条Lpp20的H-2d限制性(I-Ad和I-Ed限制性各4条)Th细胞表位,并合成15aa表位肽。 先用rLpp20免疫BALB/c小鼠,分离脾CD4+T细胞,分别用8条合成肽刺激, 进行淋巴细胞增殖实验检测,鉴定L83-97和 L58-72为Lpp20的Th细胞表位,其 MHC限制性分别为I-Ad和 I-Ad/I-Ed,L83-97和 L58-72主要引起分泌IFN-γ的Th1型细胞反应,并具有协同刺激作用。将两个表位免疫BALB/c小鼠,动物体内同样证明了可以刺激淋巴细胞的增殖。在此基础上,将筛选出的2个Th细胞表位和已鉴定的1个Lpp20的B细胞表位(L108-119)串联,采用大肠杆菌的优势密码子,上述构建的氨基酸序列转化为DNA顺序,克隆入pET22b(+)载体,并在E.coli中表达并纯化。将重组表位免疫BALB/c小鼠,T-B细胞串联表位能引起淋巴细胞增殖和抗体的产生,为研究Lpp20 在H.pylori感染中的免疫保护作用及表位疫苗的设计提供实验依据和奠定基础。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2011
期刊:生物技术
影响因子:--
作者:姜茵;奚悦;王小平;何殿殿;李妍
通讯作者:李妍
DOI:--
发表时间:2012
期刊:国际免疫学杂志
影响因子:--
作者:李妍
通讯作者:李妍
Mimotopes selected with a neutralizing antibody against urease B from Helicobacter pylori induce enzyme inhibitory antibodies in mice upon vaccination.
用针对幽门螺杆菌脲酶 B 的中和抗体选择的模拟表位在接种疫苗后在小鼠中诱导酶抑制抗体
DOI:10.1186/1472-6750-10-84
发表时间:2010-11-30
期刊:BMC biotechnology
影响因子:3.5
作者:Li Y;Ning Y;Wang Y;Peng D;Jiang Y;Zhang L;Long M;Luo J;Li M
通讯作者:Li M
DOI:--
发表时间:2013
期刊:免疫学杂志
影响因子:--
作者:李妍
通讯作者:李妍
DOI:--
发表时间:2012
期刊:中国公共卫生
影响因子:--
作者:姜茵;王小平;何殿殿;李妍
通讯作者:李妍
Notch信号通路参与幽门螺杆菌感染诱导的CD4+T细胞分化成Th1细胞的调控作用
  • 批准号:
    81971903
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55.0万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    李妍
  • 依托单位:
幽门螺杆菌Lpp20抗原引起的免疫优势CD4+T细胞应答及与胃部疾病的相关性
  • 批准号:
    81470831
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    73.0万元
  • 批准年份:
    2014
  • 负责人:
    李妍
  • 依托单位:
国内基金
海外基金