结核分枝杆菌GlmU的乙酰基转移酶和尿苷转移酶活性的研究

结核分枝杆菌是引起结核病的病原体。由于耐多药菌株的出现，现有的抗结核药物不能有效地治愈结核病，导致全球结核病发病率及死亡率的升高。因此，寻找抗结核新药迫在眉睫。双糖衔接分子(L-鼠李糖-D-N-乙酰葡糖胺)是维持结核分枝杆菌细胞壁完整性的重要组成结构。如果双糖衔接分子的生物合成途径被抑制，必将破坏细胞壁的完整性，从而导致结核分枝杆菌的死亡。结核分枝杆菌的GmlU蛋白质具有乙酰基转移酶和尿苷转移酶活性，参与UDP-N-乙酰葡糖胺(UDP-GlcNAc) 的形成。本课题拟用基因敲除方法证明结核分枝杆菌的glmU基因是分枝杆菌生长的必需基因，以确定GlmU作为研发抗结核新药的靶点；用反义RNA方法抑制glmU基因表达，测定细胞壁中聚阿拉伯半乳糖含量的改变，以确定glmU基因与细胞壁聚糖合成的对应关系；对纯化的GlmU进行酶促反应动力学特性的研究并建立筛选GlmU酶抑制剂的方法。