非小细胞肺癌EML4-ALK融合基因的检测及其与TKIs疗效相关基因和预后关系的研究

（1）完成了基于EGFR突变临床特征筛选的102例非小细胞肺癌患者EML4-ALK融合基因、EGFR基因和Ｋ-ras基因的联合检测，并对它们的临床特征进行比较分析。该成果发表于杂志“Gene, Chromosomes&Cancer”上（IF=3.99）。.（2）从102例中检测出的8例EML4-ALK阳性肿瘤标本采用免疫组化的方法EML4-ALK融合蛋白、EGFR、PTEN、EGR-1、EMT和HGF进行联合检测，未能发现上述蛋白在V1和V2变体中的差异，且由于例数太少，文章未能发表。.（3）原计划拟通过优势人群聚集（女性、不吸烟、腺癌三个因素满足其一即可入组）的方式以期获得更高的阳性检出率，但检测结果提示阳性率仍非常低，考虑到短时间难以收集具有统计学意义的例数，加上针对EML4-ALK融合基因阳性的药物Croztinib当时在国内正在进行III期临床研究，2013年7月才正式上市，因此在EML4-ALK阳性病人中验证TKIs疗效及预后关系的研究（本课题第二部分）发现已不具有可行性，我们结合本课题的实际情况，将第二部分做了一些改动，即改为细胞学层面的研究。这在中期汇报中已作过说明。.（4）常规培养人肺癌细胞株H2228(EML4-ALK融合阳性细胞株V3亚型)。证实crizotinib对H2228细胞有抑制生长的作用，且抑制作用随药物浓度增加而增加。IC50值为：334.59nM/L。而TAE684对H2228细胞没有有抑制生长的作用。.（5）采用流式细胞仪检测TKIs作用下H2228细胞株生长特征及凋亡变化，经克唑替尼处理的H2228细胞早期提示细胞出现凋亡，细胞生长明显受到抑制，随着克唑替尼剂量的增加和作用时间的延长，同时还发现Crizotinib能够使H2228细胞阻滞在G1期。.（6）对mTOR信号通路在克唑替尼诱导H2228凋亡作用机制关系进行了相关研究，采用WB方法检测药物对H2228细胞中的PI3K/AKT/mTOR信号通路中的关键蛋白表达水平的影响。目前文章数据已总结完成，文章待发表。 .（7）此外，我们目前还正在检测BIM、Hif信号通路在克唑替尼诱导H2228凋亡过程中的作用机制。. 该课题已培养毕业硕士研究生2名，在读研究生1名，已发表SCI文章一篇，后续估计仍可发表SCI文章1-2篇。