cN0期喉鳞癌患者前哨淋巴结微转移检测及关键性microRNA鉴定与功能研究

对于cN0喉鳞癌患者，特别是处于T2-T3期，术前联合PET/CT与SPEC/CT对SLN进行定性及定位分析，同时参考SUV值可有效预测区域性SLN微转移。术中使用γ探测仪进一步定位SLN，有助于手术方案选择的合理性及颈清术范围的准确性。以期在根治肿瘤的同时尽量减少不必要的手术创伤，提高患者术后生活质量。发生SLN微转移的cN0喉鳞癌中存在差异microRNA及转录组差异基因表达谱，应用6例配对的喉鳞癌及癌旁正常黏膜新鲜标本（3对cN0/pN+及3对pN0），进行microRNA 阵列分析转移癌中特有的差异性microRNA表达谱；利用Agilent human miRNA 8*60K V19.0芯片，获取两组样本间的差异microRNA表达谱。转移癌中获得差异microRNA 63个，非转移癌组中获得差异microRNA 52个，将两组差异基因行“维恩”分析，共有性差异microRNA 18个，转移癌独有性差异microRNA 45个，非转移癌独有性差异microRNA 34个，利用mRNA芯片（Agilent Human mRNA 4*44K 芯片），追加检测编码基因在转移性喉鳞癌和非转移性喉鳞中的差异基因表达谱，并与先前的microRNA表达谱联合分析，首次得出与转移相关的microRNA-mRNA negative correlation profile。转移癌组中获得差异基因 2836个，非转移癌组中获得差异基因 1183个，将两组差异基因行“维恩”分析，共有差异基因 583个，转移癌独有差异基因 2253个，非转移癌独有差异基因 600个。通过GO/KEGG分析发现转移癌中上调的mRNA显著富集于细胞迁移/黏附/侵袭/细胞恶性增殖/细胞代谢。从中挑选hsa-miR-145-5p，hsa-miR-204-5p，hsa-miR-130b，hsa-miR-155及hsa-miR-301-3p重点研究。利用体外、体内细胞功能实验、双荧光报告检测、Loss-of-function、Gain-of-function、共聚焦、电镜等技术探讨他们与喉鳞癌转移侵袭能力中的作用及相关分子生物学机制。