组蛋白乙酰化、甲基化改变对酵母Elongator功能和特定基因转录的影响

表观遗传修饰对基因表达有重要影响。已知酵母Elongator作为HAT参与RNAPII的转录延伸。我们的前期研究表明其功能并非仅与组蛋白H3/H4两已知位点乙酰化有关；生物信息学分析进一步显示其Elp3亚基可能有组蛋白去甲基化酶活性。为洞悉表观遗传修饰与酵母Elongator功能和特定基因表达的关系，本课题拟在现有工作基础上通过组蛋白突变株的功能互补和基因表达分析，研究H3/H4乙酰化、甲基化水平改变对Elongator功能和特定基因转录的影响。运用RNA免疫沉淀确定特定组蛋白乙酰化、甲基化位点突变时，复合物是否参与GAL1等的转录。表达纯化Elp3蛋白，进行体外组蛋白去甲基化酶活性测定；通过酵母双杂交或免疫沉淀实验确定与复合物相互作用的蛋白或延伸因子；该项目完成有助于建立Elongator通过表观遗传修饰参与基因表达调控的模型，为进一步研究人类该复合物功能、探索某些疾病发生机理奠定基础。