辽宁碱蓬CMO基因启动子盐诱导元件鉴定及相关转录因子分离

在前一个国家自然科学基金小额项目的资助下，我们从盐生植物辽宁碱蓬中分离了盐诱导表达的胆碱单加氧酶（CMO）基因启动子(CMO-p)（2 kb），生物信息学分析发现该启动子中含有多个胁迫应答元件。将该启动子与GUS基因相连，转化烟草，发现转基因烟草中GUS基因的表达受盐胁迫诱导，说明该启动子是盐诱导启动子。本研究就是在前面研究的基础上，通过５′端缺失技术确定该启动子中的盐胁迫应答区域；通过DNA足迹分析实验、凝胶阻滞实验鉴定盐诱导元件；在此基础上，一方面分离已知的抗盐转录因子，研究其与盐诱导元件的相互作用，另一方面，应用酵母单杂交技术分离与盐诱导元件相互作用的未知转录因子，研究其作用，从而为探明CMO基因的转录调控机制奠定基础。同时，利用CMO-p的盐诱导元件与CaMV 35S启动子融合，构建新的盐诱导型植物表达载体，以期应用于抗盐植物基因工程，提高转基因植物的抗盐性，培育抗盐作物新品种。