基于微波加热-分子印迹技术的液质联用单次高通量测定人体血清中多种性激素
批准号:
81401744
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
23.0 万元
负责人:
张瑞
依托单位:
学科分类:
检验医学研究新技术与新方法
结题年份:
2017
批准年份:
2014
项目状态:
已结题
项目参与者:
岳乔红、徐焰、程晓东、刁艳君、旦正尖措
中文摘要
近年来,液质联用技术在医学检验领域发展迅速成为研究热点,其激素检测几乎可以诊断所有的类固醇相关障碍性疾病,专家预言它必将成为激素检测的核心技术。我们的研究和文献表明,国内外已有液质联用检测性激素进行临床疾病诊断及筛查的报道,但其前处理过程较为复杂耗时且部分激素回收率不高,极大地阻碍了其发展和应用,如何建立快速简便有效的样品前处理方法成为多种性激素检测中迫切需要解决的问题。我们前期采用传统固相萃取-液相色谱法研究了简单样品中的14种性激素,证明采用传统固相萃取法简便可行但部分激素回收率不高,本课题拟在此基础上,提出采用微波加热-分子印迹技术构建对性激素有特异性吸附的磁性碳纳米管接枝分子聚合物提高激素回收率,并建立基于磁性纳米复合材料的在线固相萃取-液质联用检测方法,高通量快速简便自动化的测定多种性激素。这些研究将提高我国性激素检测水平,其原理可用于血清中其他激素及小分子物质的高通量快速检测。
英文摘要
Recently, high performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry (HPLC/MS/MS) has been developed quickily and become one of the attractive research in clinical laboratory medicine area. In order to overcome many limitations of immunoassays, HPLC/MS/MS has the potential to become the critical technique in steriod hormones measurement. As is reported, HPLC/MS/MS has been applied for determination of steriod hormones on domestic and overseas clinical laboratory for clinical diagnostics and analysis, however, the pretreatment method is complicated and time-consuming. Thus, a simple, reliable, sensitive and cost-effective method should be developed. In our last research, traditional solid phase extraction(SPE) –HPLC technique has been used for extraction and determination of 14 steriod hormones in simple samples. SPE techquic has been proved to be a simple and effective pretreatment method for steriod hormones measurement, but the recoveries for some hormones are not satisfactory and the time for HPLC determination is long. microwave assisted molecularly imprinting technique is proposed to synthesized magnetic carbon nanotubes molecularly imprinted polymers(MMIPs) to increase selectivity and recoveries of steriod hormones. On the basis of magnetic carbon nanotubes molecularly imprinted polymers, on line SPE-HPLC/MS/MS method was developed for steriod hormones measurement. These studies will improve the level of steriod hormones measurement in our country, and the principle can expand for rapid detection of other hormones and small moleculars in serum.
近年来,液质联用技术在医学检验领域发展迅速成为研究热点,其激素检测几乎可以诊断所有的类固醇相关障碍性疾病,专家预言它必将成为激素检测的核心技术。我们的研究和文献表明,国内外已有液质联用检测性激素进行临床疾病诊断及筛查的报道,但由于其浓度低,干扰多,前处理过程较为复杂耗时且部分激素回收率不高,极大地阻碍了其发展和应用,如何建立快速简便有效的样品前处理方法成为多种性激素检测中迫切需要解决的问题。本项目提出一种新的高通量检测人体血清中多种性激素的方法。通过采用分子印迹法构建磁性碳纳米管接枝分子聚合物提高对性激素的特异性吸附来提高回收率降低基质效应,从而建立一种三相萃取体系应用于血清样品中痕量物质的“选择”及“动态”萃取分离。由于构建纳米复合材料的过程中需要长时间反复加热,提出采用微波加热技术缩短构建纳米复合材料的时间,在合成新型纳米复合材料的基础上建立固相萃取-液质联用方法。课题研究优化了前处理和液质联用检测过程的各个环节,包括固相萃取柱类型的选择、洗脱溶剂、干扰研究和色谱和质谱条件等。所建方法使用合成的材料用于性激素的样品前处理,优化了分析过程,提高了相关性激素的回收率。血清中性激素测定方法的批内和批间变异系数范围分别为2.58% ~7.52%和3.55% ~8.02%,回收率为53.19% ~96.99%,取得满意结果并且成功建立了本实验室相关性激素的参考范围。综上所述,本项目较好的解决了人体血清中多种性激素的高通量检测问题,将有利于推动我国现行人体血清性激素检测的水平,提高我国人体性激素检测的国际竞争力,为研究性激素与各种疾病之间的关系奠定有力的测定基础。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:
--
发表时间:
2015
期刊:
国际检验医学杂志
影响因子:
--
作者:
[张瑞, 周铁成, 郝晓柯, 岳乔红]
通讯作者:
岳乔红
Comparison of Two Ionic Liquid-Based Pretreatment Methods for Three Steroids' Separation and Determination in Water Samples by HPLC
两种离子液体预处理方法对水样中三种甾体化合物HPLC分离测定的比较
DOI:
10.1007/s10337-016-3215-9
发表时间:
2017-01
期刊:
CHROMATOGRAPHIA
影响因子:
1.7
作者:
[Zhang Rui, Cheng Xiaodong, Guo Jin, Zhang Hanqi, Hao Xiaoke]
通讯作者:
Hao Xiaoke
新型锌指核蛋白ZNF706在c-Myc驱动肝细胞癌发生发展和氧化还原稳态中的作用机制研究
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批准号:82472702
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项目类别:面上项目
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资助金额:49.00万元
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批准年份:2024
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负责人:张瑞
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依托单位:
转录因子FoxM1通过调控免疫微环境促进肝癌进展的机制研究
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批准号:--
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项目类别:面上项目
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资助金额:54.7万元
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批准年份:2021
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负责人:张瑞
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依托单位:
间充质干细胞、外泌体“双保险”负载miRNA协同TRAIL杀伤恶性脑胶质瘤的功能及机制研究
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批准号:81773262
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项目类别:面上项目
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资助金额:55.0万元
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批准年份:2017
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负责人:张瑞
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依托单位:
SOX4-HNF3a/ERα-miR-26-SOX4反馈环路在肝细胞癌发生发展中的功能及机制研究
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批准号:81572763
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项目类别:面上项目
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资助金额:57.0万元
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批准年份:2015
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负责人:张瑞
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依托单位:
抗泛素修饰长效Survivin显性负突变体的构建表达及其肿瘤细胞杀伤作用研究
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批准号:30901771
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项目类别:青年科学基金项目
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资助金额:20.0万元
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批准年份:2009
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负责人:张瑞
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依托单位:
国内基金
海外基金