细菌氧化还原蛋白azurin 诱导骨肉瘤细胞凋亡的分子机制

本研究在前期基因重组技术获得实验用纯化细菌氧化还原蛋白Azurin并诱导人骨肉瘤细胞凋亡成功基础上，以三株人骨肉瘤细胞Saos-2、MG63 、U20S（p53突变、缺失和野生型）和自行构建可诱导p53双重稳定定量真核表达细胞株为研究对象，通过MTT、电镜、FCM、LSCM、Western blot、TUNEL、RT-PCR和免疫细胞和组织化学和ELISA 等分子生物学及相关技术，进行Azurin的体外细胞和体内接种成瘤动物的凋亡系列实验研究。以与p53关系为重点，研究p53与凋亡的死亡受体通路和线粒体通路相关凋亡子Fas/FasL、Bax/Bcl-2、caspase 家族和Cyto.c等在Azurin诱导骨瘤细胞凋亡中相互关系及可能的凋亡信号转导机制，明确Azurin 诱导骨肉瘤细胞凋亡的分子机制。为活菌纯化小分子蛋白Azurin作为一种新的方法治疗骨肉瘤提供详实、、客观、科学的依据。