本课题在前期工作的基础上，对杜仲叶总提取物进行了进一步药效及机制研究,并对杜仲叶进行了系统的化学成分分离，采用细胞及分子生物学手段揭示了其活性物质基础，并阐明了其作用机制。实验结果如下：.杜仲叶总提取物的药理作用：（1）可以防治去势大鼠骨质疏松症，能明显增加其骨密度、骨小梁数量、以及改善骨代谢平衡；（2）能促进SD 大鼠成骨细胞增殖、骨钙素的表达；（3）可以通过提高ERK和AKT磷酸化表达水平，激活Shp2及促进Erk 的活性，促进大鼠成骨细胞的增殖，且成骨细胞增殖率随药物浓度的升高而升高；（4）可以通过激活Shp2 的磷酸化从而促进大鼠大鼠骨质间质干细胞的增殖。.本课题组对杜仲叶进行了系统的化学成分提取分离，从中分离得到85个化合物，鉴定了其中56个化合物的结构，其中包括环烯醚萜类化合物11个、苯丙素类化合物9个、黄酮类化合物8个、木脂素类化合物12个、其它类型化合物16个。.对以上56种化学成分进行了活性筛选和作用机制研究，结果表明：（1）绿原酸可以通过激活Shp2 继而促进Erk 的活性，从而促进大鼠成骨细胞增殖；（2）槲皮素、芦丁、金丝桃苷、槲皮苷4种成分均可协同经典成骨诱导剂干预细胞，对SD大鼠BMSCs成骨分化具有促进作用，同时槲皮素、芦丁、金丝桃苷在成骨分化过程中对关键转录因子Runx2、Osterix表达在一定范围内具有浓度依赖性；（3）槲皮素还可通过激活ERK 磷酸化，从而促进BMSCs 细胞的增殖；（4）槲皮素、槲皮苷、(+)-丁香脂素、松脂醇二葡萄糖苷4种成分能抑制BMSCs脂向分化，其中槲皮素和(+)-丁香脂素是通过下调PPARγ2、C/EBPαmRNA 的表达、进而达到抑制大鼠BMSCs 成脂分化作用的。.因此认为，杜仲叶中芦丁、金丝桃苷可促进BMSCs成骨分化；(+)-丁香脂素、松脂醇二葡萄糖苷能抑制BMSCs脂向分化；而槲皮素、槲皮苷既可以促进BMSCs成骨分化，又可以抑制BMSCs脂向分化。