转移相关蛋白3调控食管鳞癌转移起始的分子机制

本项目自立项以来，在基金委的支持下，在本课题组的共同努力下，不仅取得了相应的研究成果（见下文）， 并充分应用这一课题的资助，针对当地食管癌高发的情况（潮汕地区是我国唯一沿海食管癌高发地区），充分发挥病源丰富和课题主持人研究背景的优势，开展了建库（建立了食管癌标本库），建模（建立了食管癌小鼠模型：化学诱导结合基因敲除技术）和建队伍（建立了以本课题为中心的食管癌研究队伍，其中一人已经在本课题基础上获得一项国家自然科学基金）。申请人根据原计划应用体外细胞培养和临床标本证明了MTA3在调节食管鳞癌转移中起重要作用。在研究过程中又有新的发现：MTA3不仅调节转移浸润，也对细胞增殖生长有作用，且通过与以往不同的分子通路。在研究过程中，发现MTA3食管癌转移调控的路径中，可能有别于乳腺癌，通过其它新的通路调控肿瘤转移。具体成果包括：1. 建立数个MTA3稳定过表达和敲除的食管鳞癌细胞株，研究MTA3表达上调或下调对肿瘤细胞侵袭能力、细胞活力、克隆形成能力和非锚定生长依赖性能力等多个关键指标的影响，结果表明MTA3不仅影响肿瘤细胞侵袭能力，还影响细胞存活。2. 从分子水平上阐明了MTA3的抑癌机制，证明了MTA3与数个经典通路或新的信号通路的关系。应用稳定转染技术，证明在食管鳞癌细胞中过表达MTA3可有效上调细胞周期关键基因p21和肿瘤转移相关基因KLF4等关键分子的表达。进一步研究发现了MTA3潜在下游基因还包括了PTPRO和Pak1等。3. 挖掘了MTA3的临床转化应用价值。通过药物实验，我们发现天然药物单体EGCG抑制食管癌细胞增殖，且浓度梯度依赖性上调MTA3表达，提示MTA3是EGCG潜在的药物靶点。4. 证实MTA3可以作为临床预后与诊断的指标。完成了49例食管鳞癌石蜡包埋组织标本的免疫组化分析，并结合临床随访资料，证明MTA3低表达是食管鳞癌患者不良预后指标。5. 建立了相应的食管鳞癌动物模型。应用4-NQO成功建立了化学诱导食管癌模式小鼠，为进一步深入研究MTA3及其相关基因功能打下坚实基础。本课题研究成果为抑制食管鳞癌转移提供了理论基础，对将MTA3转化成临床诊断和治疗靶点具有重要指导意义。