本课题采用斑马鱼和P19细胞进行体外实验，对以视黄酸代谢中的关键基因，RDH和Raldh2在脊椎动物-斑马鱼心脏发育中的机制进行研究，建立了斑马鱼Raldh2和RDH基因敲除动物模型，并以P19细胞为研究对象，构建基因表达载体和沉默表达载体。开展了以下研究并获得了如下实验结果：1.RDH基因功能下调斑马鱼表现出斑马鱼心脏、鳃弓和神经嵴细胞的发育缺陷，并且表现出心脏功能障碍，RDH基因下调斑马鱼表型具有视黄酸缺乏动物模型的典型特征，证实RDH与Raldh2同样是视黄酸合成中的关键酶。 2.Raldh2基因下调斑马鱼表现出与RDH基因功能下调斑马鱼相似的动物表型，只是表型更为严重。说明Raldh2的作用，不像RDH，功能上有其他成员可以对其功能进行代偿。3.构建RDH和Raldh2的表达载体和沉默表达载体，Raldh2下调会改变基因表达模式。实时定量PCR和western结果均显示，与对照组细胞相比，Raldh2基因下调P19细胞心肌分化特异性的分子标记物表达水平下降。Raldh2基因下调导致Gata4、Mef2c、a-MHC 和CTnT 的表达水平下调，同时心脏前体特异基因-Nkx2.5的表达却明显上调。Rdh10干扰会改变P19细胞向心肌细胞诱导过程中的基因表达模式，心肌细胞特异性的分子标记物Ctnt表达水平明显下调，而心肌前体特异性转录因子Nkx2.5的表达明显升高，Rdh10干扰载体转染P19心肌细胞特异性转录因子的表达变化模式细胞与Raldh2干扰载体转染P19细胞相似。说明Rdh10基因下调可以导致视黄酸缺乏的特征。.视黄酸信号通过调节心肌发育相关基因的表达，从而对心肌前体的分化和发育过程起着重要的调节作用。通过以上研究，我们获得了RDH和Raldh2影响斑马鱼心脏发育的形态学和分子生物学证据，初步明确RDH和Raldh2在心肌发育中的作用及与心肌发育相关基因的关系，并了解了RDH和Raldh2在功能上的异同点。