温肾阳中药调控成骨细胞功能的分子信号平衡机制研究

本研究采用细胞模型与大鼠去卵巢动物模型相结合的方式，比较了温肾阳法和滋肾阴法对大鼠骨形成指标及Sclerostin/Wnt/Runx2信号环路基因蛋白表达的影响。实验综合运用了原代细胞分离培养技术、含药血清制备技术、细胞免疫荧光技术、反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）、蛋白免疫印迹法（Western Blotting）、双能X线测定仪（DEXA）、Micro-CT骨三维重建技术、硬组织切片技术、荧光双标记等多种先进技术手段。研究结果显示，温肾阳中药可促进成骨细胞增殖、上调碱性磷酸酶、I型胶原蛋白的表达，上调Wnt7b、Runx2蛋白的表达，作用强于滋肾阴中药；右归丸、淫羊藿干预24h后即可促进脂肪间充质干细胞的增殖，优于左归丸及枸杞；温肾阳中药可明显促进细胞碱性磷酸酶的表达及矿化结节的形成，上调Runx2、 wnt3a、Lef-1、β-catenin的表达，下调GSK-3β和Sclerostin的表达。体内实验证实，温肾阳中药可以提高大鼠腰椎及股骨骨密度、提高大鼠骨体积分数，增大骨小梁数目和厚度、降低骨小梁分离度，上调大鼠Runx2的表达、抑制Axin、SOST的表达。. 通过以上研究可以初步证实，温肾阳中药表现出可以促进骨形成、改善骨微结构的趋势，可能是通过对Sclerostin/Wnt/Runx2信号环路的调节实现的。在此期间，发表论文26篇（其中SCI文章2篇）；出版著作6部；获得各级奖励8项。