基于体外定向进化的人α防御素5抗病毒活性筛选及功能验证

病毒感染性疾病严重危害人类健康，寻找高效、低毒且不易使病毒产生耐药的新型抗病毒药物具有重要意义。人α防御素5（HD-5）是一种存在于肠道和生殖道粘膜的内源性抗菌肽，同时它还具有一定程度抗HSV和HPV等病毒的作用。该分子对人体正常细胞无毒，细菌及病毒也不会对其产生耐药。HD-5的生物学特性与自身适应性进化密切相关，通过选择性进化可能会使其抗病毒活性显著提高。为此，本项目拟对HD-5进行体外抗病毒能力选择性进化与筛选：通过寡核苷酸合成结合定点随机突变方式构建HD-5突变体库，采用定点整合系统实现不同突变体在CHO细胞中的一致性表达，经单细胞克隆、MTT分析等方法筛选抗病毒（以HSV-2为代表）活性增强的HD-5突变体，重复2轮突变与筛选，最终获得抗病毒能力显著提高的HD-5突变体，然后对其进行抗病毒活性、耐药性、细胞毒性等功能验证。本项目的实施有望为HSV及相关病毒感染的有效防治提供新措施。