Kisspeptin54对乏情季节滩羊繁殖的作用及其机制研究
批准号:
31760665
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
38.0 万元
负责人:
淡新刚
依托单位:
学科分类:
畜禽繁殖学
结题年份:
2021
批准年份:
2017
项目状态:
已结题
项目参与者:
史远刚、陶金忠、赵洪喜、陈绍淑、李鹏、赵国丽、韩丽云
中文摘要
Kisspeptin是Kiss1基因的产物,对GnRH的释放具有明显的调控作用,与动物季节性繁殖关系密切。宁夏滩羊为季节性发情动物,产羔率较低。为了诱导滩羊在乏情季节发情、排卵,本研究通过给乏情季节雌性滩羊单次重复和连续静脉注射kisspeptin54 48h或72h, 然后kisspeptin54共培养垂体细胞、卵母细胞、卵巢颗粒细胞,通过RIA、ELISA检测激素水平、流式细胞技术检测细胞周期变化、q-PCR和Western blot检测相关基因及蛋白表达来明确kisspeptin54对乏情季节滩羊繁殖的作用,阐明其在下丘脑-垂体-性腺轴上调控乏情季节滩羊繁殖的机制,为开发滩羊乏情季节繁殖调控新技术提供理论依据和前期技术支持。
英文摘要
Kisspeptin is the product of Kiss1 gene,it is closely associated with season reproduction apart from regulating GnRH release in animals. Tan-sheep belongs to seasonal oestrus animal with low lambing rate in Ningxia province. In order to induce oestrus and ovulation of Tan-sheep in anestrous season, kisspeptin54 will be injected to female Tan-sheep by single repeated injection or continuous infusion lasting 48h or 72h, then pituitary cells, oocyte and ovarian granulosa cells are co-cultured with kisspeptin54,respectively.The role of kisspeptin54 on reproduction of Tan-sheep will be revealed and the mechanism of kisspeptin54 regulating reproduction in hypothalamic-pituitary-gonadal axis will be explored in anestrous season by detecting hormone levels,cell cycle changes, the expression of related genes and proteins with RIA, ELISA,flow cytometry, q-PCR and Western blot. It will offer theoretical basis and early technical supports for developing a novel reproductive technologies of Tan-sheep in anestrous season.
Kisspeptin是Kiss1基因的产物,对GnRH的释放具有明显的调控作用,与动物季节性繁殖关系密切。宁夏滩羊为季节性发情动物,产羔率较低。为诱导滩羊在乏情季节发情、排卵,本研究体内用kisspeptin 处理乏情期滩羊;体外分离、培养滩羊原代腺垂体细胞和卵巢颗粒细胞,并与kisspeptin共培养,通过组织转录组测序、ELISA、q-PCR、Western blot等技术探讨kisspeptin54对滩羊乏情期繁殖的影响及调控机制。项目(1)明确kisspeptin54处理能够激活繁殖轴,触发滩羊发情,垂体和卵巢组织高通量测序初步揭示CREB3L1、PRLHR、FOXB1、CACNA1S、GDF10、SAMD3、MAP3K9、StAR、CYP17、HSD17β1、CCND1、INHA等关键基因参与调控滩羊繁殖;(2)建立滩羊腺垂体细胞分离培养体系,明确500 ng/mL kisspeptin能够促进腺垂体细胞FSH和LH分泌,揭示kisspeptin可能通过促进腺垂体细胞增殖或上调GnRHR的表达来促进促性腺激素的生成,kisspeptin除了PLC/PKC/Ca2+通路外,还可能通过AC/cAMP/PKA通路来调控促性腺激素的生成;(3)kisspeptin促进滩羊卵母细胞体外成熟,上调c-mos、GDF-9和BMP-15 mRNA表达。证实kisspeptin能够促进滩羊卵巢颗粒细胞甾体激素分泌,kisspeptin可通过上调STAR、CYP19、HSD17B2、FSHR、ERβ、PGR、LHR的表达促进颗粒细胞类固醇激素生成,kisspeptin通过PLC/PKC/MAPK信号通路调控颗粒细胞甾体激素的合成。这些结果完善了kisspeptin在整个生殖轴上调控滩羊繁殖的理论知识,为开发kisspeptin介导的滩羊繁殖调控新技术提供了理论依据。
期刊论文列表
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专利列表
DOI:
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发表时间:
2020
期刊:
畜牧兽医学报
影响因子:
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作者:
[杜旭旭, 梅山, 史远刚, 淡新刚]
通讯作者:
淡新刚
kisspeptin下调miR-10a通过miR-10a-mRNA-MAPK-ERK/PI3K-AKT通路调控滩羊卵巢颗粒细胞功能的分子机制
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批准号:32460835
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项目类别:地区科学基金项目
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资助金额:32万元
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批准年份:2024
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负责人:淡新刚
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依托单位:
国内基金
海外基金