凋亡抑制蛋白ILP-2与乳腺癌生长的关系及分子机制
批准号:
81360397
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
50.0 万元
负责人:
向明钧
依托单位:
学科分类:
H1803.肿瘤细胞命运
结题年份:
2017
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
黄纯海、周卫华、王小莉、张洁、杨梅松竹、丁晓岚
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中文摘要
ILP-2 是新发现的凋亡抑制蛋白,它对乳腺癌生长的影响尚未见报道。我们前期实验显示ILP-2 在乳腺癌(术前)患者血清及乳腺癌细胞中含量较高,据此推测ILP-2 可能与乳腺癌生长关系密切。本项目拟采用临床切除的乳腺癌及癌旁组织分析ILP-2 与乳腺癌生长的相关性;RNAi 下调乳腺癌细胞ILP-2 表达,RT-PCR、Western blot、MTT、流式细胞仪分析细胞生长变化;RT Profiler PCR Arrays研究ILP-2对Caspase-9、 Smac基因的作用;MCF-7等细胞共转染ILP-2 和Caspase-9、Smac 表达载体, Western blot、免疫共沉淀、BRET 研究ILP-2 与Caspase-9、Smac 的作用;建立人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,探讨ILP-2 作为乳腺癌基因治疗分子靶的可行性。本研究旨在为乳腺癌基因治疗寻找新靶点提供实验依据。
英文摘要
ILP-2( Inhibitor of Apoptosis Protein-Like Protein-2 ) is the newly discovered inhibitor of apoptosis protein. Our preliminary data evidenced a higher ILP-2 expression in the breast cancer (preoperative) patients′ sera samples and the breast cancer cells implying a relationship between this protein and breast cancer. So far, the exact role of ILP-2 in the breast cancer is still unknown. Based on our preliminiary data, we hypothesize that ILP-2 may play a pathogenic role in the breast cancer growth. The aim of the project proposed here is to analyze the role and molecular mechanism of the ILP-2 to the breast cancer growth.We are going to analyze the correlation of the ILP-2 expression and the breast cancer growth in the breast cancer tissue samples and the breast carcinoma sides tissues samples using real time RT-PCR, Western blot and immunohistochemistry technology. At the same time, in order to verify the authentic role of ILP-2 in the breast cancer, we will examine the growth of the human breast cancer cells in case of silencing of ILP-2 by RNAi technology.Also,the Human Breast Cancer RT2 Profiler? PCR Array will be applied to analyze the correlation of the ILP-2 gene and the Caspase-9 or Smac gene. Furthermore,immunoprecipitation will be applied to elucidate the protein-protein interaction between ILP-2 and Caspase-9,Smac,etc. by co- transfection of ILP-2 with Caspase-9 or Smac expression vector into the MCF-7 cells,etc.The interaction of ILP-2 and Caspase-9 or Smac will be also examined in the human breast cancer cells in a real time manner using bioluminescence resonance energy transfer technology (BRET). Finally, the human breast cancer xenograft in nude mice will be used to investigate the therapeutic potentiality of ILP-2 as a molecular target in the breast cancer treatment.
凋亡抑制蛋白ILP-2 在乳腺癌(术前)患者血清及乳腺癌细胞中含量较高,但它对乳腺癌细胞生长的作用及分子机制尚未见报道。.我们研究了乳腺癌等组织及乳腺癌细胞中ILP-2的表达情况。在用RNAi技术敲低乳腺癌细胞ILP-2表达的基础上分析了乳腺癌细胞的生长、迁移和凋亡。用免疫共沉淀(IP)试验分析了细胞(MCF-7)中与ILP-2有相互作用的蛋白,用iTRAQ技术进一步研究了ILP-2对乳腺癌细胞生长中的作用机制。用Pull down及BRET研究明确ILP-2促进乳腺癌生长的机制。建立人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,探讨ILP-2 作为乳腺癌基因治疗分子靶的可行性。. 通过如上研究发现,ILP-2在乳腺癌组织中阳性率高达到62.8﹪,且在乳腺癌细胞中也高表达;ILP-2促进了乳腺癌细胞的迁移和生长;蛋白CHK2与ILP-2关系密切;ECM(P85)等与ILP-2有相互关联;在人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型中ILP-2敲除后对MCF-7的成瘤有缓解的作用。.该研究的创新和意义在于:.1.在明确ILP-2可为乳腺癌血清标志物的基础上研究其乳腺癌组织和细胞的表达,进而分析ILP-2对乳腺癌细胞生长的作用,为进一步探讨ILP-2促进乳腺癌细胞生长的机制奠定了基础。.2.在明确了ILP-2促进乳腺癌细胞生长的基础上从分子、细胞及动物整体水平阐明了ILP-2 对乳腺癌生长的分子机制。.3.探讨ILP-2 作为乳腺癌基因治疗分子靶的可行性,从而为进一步研究ILP-2的生物学功能、寻找乳腺癌基因治疗的新靶点及研制相应抗癌药物提供实验依据。
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Nrf2: bane or blessing in cancer?
Nrf2:癌症的祸根还是福气?
DOI:10.1007/s00432-014-1627-1
发表时间:2014-03
期刊:Journal of Cancer Research and Clinical Oncology
影响因子:3.6
作者:Xiang MingJun;Namani Akhileshwar;Wu ShiJun;Wang XiaoLi
通讯作者:Wang XiaoLi
DOI:--
发表时间:2016
期刊:环境化学
影响因子:--
作者:向明钧;陈玲;李宇丹;张钰华;周佩云;刘铁军;孙远鹏;伍梦娟;方星薪;杨超萍
通讯作者:杨超萍
凋亡抑制蛋白ILP-2 调控线粒体自噬促进乳腺癌细胞生长的机制研究
- 批准号:2024JJ7413
- 项目类别:省市级项目
- 资助金额:0.0万元
- 批准年份:2024
- 负责人:向明钧
- 依托单位:
凋亡抑制蛋白ILP-2调控细胞自噬促进乳腺癌细胞生长的机制研究
- 批准号:2020JJ4513
- 项目类别:省市级项目
- 资助金额:0.0万元
- 批准年份:2020
- 负责人:向明钧
- 依托单位:
国内基金
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