Menin通过IGFs信号通路调控胚胎神经系统发育的组蛋白甲基化修饰机制

为深入明确Men1基因在神经系统发育中作用及机制，我们已经成功建立稳转Men1基因过表达及Men1基因干扰神经细胞系，我们通过基因芯片筛选和鉴定发现Men1基因显著调控CDK5/P35转录和表达。我们分别在原代培养神经元以及HT22和N2a神经细胞系中行Men1基因干扰或过表达，发现Men1基因干扰后CDK5/P35转录和翻译水平显著下调，而Men1基因过表达后CDK5/P35转录和翻译水平显著上调。为确定Men1是否影响P35蛋白稳定性，我们以蛋白质合成抑制剂放线菌酮（CHX）处理Men1干扰后的神经元，发现其并不影响P35蛋白的稳定性。因而，Men1极有可能在转录水平上影响P35表达。我们接着在原代神经元上行Men1干扰后P35的Luciferase活性及ChIP检测，双荧光素酶报告基因显示，P35荧光素酶活性显著下降；进一步染色质免疫共沉淀（ChIP）发现Men1基因直接结合在P35启动子上。我们首先在稳转Men1基因的神经细胞系中发现Men1显著促进神经元迁移，进一步通过胚胎电转实验发现Men1干扰后显著抑制皮层神经元的迁移，大部分神经元滞留于IMZ\SVZ\VZ层，极少到达CP层。而补充P35后，显著改善其迁移状况，大部分神经元迁移到CP层。因此，我们通过大量实验证实了Men1通过P35影响神经元迁移，进而参与胚胎神经发育。