克仑特罗是一种扩张气管治疗哮喘的药，因为它可以提高动物的生长速度和瘦肉率，因此曾经被广泛应用于畜牧生产中。然而食用残留克仑特罗的动物性食物对人体有害，我国和欧盟都已明令禁止在畜牧生产中使用克仑特罗。目前克仑特罗常用的检测方法有液／质联用法 、气／质联用法和酶联免疫吸附法。虽然这些方法的灵敏度较高，但检测时间较长，需要熟练的操作人员和复杂的仪器设备。以胶体金为标记物的免疫层析法具有一步加样、便捷、结果判断直观、经济、不需特殊设备的特点。本课题组在前期工作中成功建立了克仑特罗胶体金检测方法。然而这种方法的灵敏度较低，从而限制了其在食品安全领域的应用。在本研究中，我们选择荧光微球作为标记物，以建立一种灵敏度更好的免疫层析方法。通过碳二亚胺法，荧光微球表面的羧基与抗克仑特罗的单克隆抗体结合，应用扫描电镜、荧光分光光度计、纳米粒度仪和凝胶电泳对其进行表征并提示偶联状况。通过荧光微球试纸条读取仪对试纸条的检测线（T线）和质控线（C线）的荧光强度进行扫描，对所制备的荧光微球免疫层析试纸条进行荧光强度动力学分析。同时，样品的加样方式也进行了比对，一种是直接将样本加到荧光微球免疫层析试纸条的加样孔中，另一种是在酶标孔中预先加入荧光微球抗体复合物，加入样本充分混合后再加到荧光微球免疫层析试纸条的加样孔中。结果显示，基于纳米荧光探针的免疫层析T线和C线的荧光强度在55分钟内都持续增强，T/C比在30分钟内可达到平衡。以T/C比读数，在酶标孔中加样，不仅可以提高荧光微球免疫层析试纸条的灵敏度，而且可以减低其变异系数。优化条件后，试纸条的IC50值为0.12 ng/ml，在猪尿中的最低检测限为0.01 ng/mL，与酶联免疫吸附法的结果一致，从而成功地建立了克仑特罗残留的快速、高灵敏度的现场定量检测方法。