锌指蛋白ZFX在T1-2期直肠癌淋巴结转移中的作用及分子机制研究

近年来研究已证实锌指蛋白X（ZFX）可作为转录因子在多种恶性肿瘤的发生发展中发挥着重要作用，但在结直肠癌（CRC）相关领域的研究却鲜有报道。本研究首先探讨了ZFX在CRC组织中的表达及其临床意义。通过临床大样本研究发现ZFX表达水平与CRC患者的淋巴结转移情况、远处转移情况及肿瘤TNM分期显著相关。进一步研究发现ZFX表达可作为预测CRC预后的独立危险因素。相关研究提示ZFX参与CRC发生发展过程。其次为了研究ZFX表达与EMT的关系，本研究分别从组织学水平、细胞学水平中验证发现ZFX mRNA表达与EMT过程中上皮分子标志物E-cadherin表达呈负相关关系，而与间质分子标志物N-cadherin、Vimentin表达呈正相关关系。提示ZFX分子可通过促进E-cadherin表达，而抑制N-cadherin、Vimentin表达来诱导调控EMT的发生。然后本研究对CRC细胞株的恶性生物学功能进行了研究。结果发现ZFX高表达可促进CRC细胞增殖，抑制细胞凋亡；此外还发现高表达ZFX细胞株的运动迁移能力较强。提示ZFX通过促进细胞增殖和运动，抑制凋亡参与肿瘤发生发展过程。为明确ZFX的作用机制，本研究利用基因芯片技术进行了交集差异基因的功能分析。KEGG通路富集显示，MAPK信号通路及癌症相关通路是ZFX参与CRC发生发展过程的两条关键通路。进一步通过蛋白水平的验证，我们发现敲减ZFX可通过上调p38并下调ErK影响MAPK通路，从而调控肿瘤细胞增殖及EMT过程。另一方面，我们对癌症相关通路中的凋亡相关分子进行了蛋白水平的验证，发现ZFX表达减少可下调MDM2同时上调p53、caspase3/9来调控肿瘤细胞的凋亡过程。而ZFX参与凋亡相关分子的调控也提示ZFX分子可能和肿瘤放疗敏感性密切相关，而这一领域可作为ZFX分子的新的研究内容。综上所述，本课题提示ZFX分子通过下调p38并上调ErK影响MAPK通路，从而调控肿瘤细胞增殖及EMT过程，可能是参与CRC发生发展的重要机制。