血管化人工骨的体外构建及应用基础研究

在完成骨髓间充质干细胞和肾血管内皮细胞分离、扩增和诱导分化的前期工作基础上，以聚乳酸-聚羟基乙酸-胶原共聚物为支架材料，以骨髓间充质干细胞和血管内皮前体细胞为种子细胞，建立同时含这两种细胞的三维直接培养与间接培养体系；通过考马斯亮蓝蛋白质定量、免疫组织化学、分子生物学、放射免疫和酶标分析技术，定量检测复合培养体系中成骨细胞的蛋白质、骨钙素、碱性磷酸酶活性和I型胶原的表达，研究血管内皮细胞对成骨细胞增殖分化和功能的调控，探讨血管内皮细胞和成骨细胞之间的相互作用和机制；以含有血管内皮细胞和骨髓间充质干细胞构建的血管化人工骨为实验组，以单纯含骨髓间充质干细胞人工骨为对照组，植入兔颌骨缺损区，通过软X线、骨密度分析、染料灌注、HE染色、免疫组织化学和分子杂交等技术，定性和定量测定两种人工骨植入区的成骨细胞增殖、分化、骨形成、骨改建及血管形成等指标，探讨血管化人工骨修复大范围颌骨缺损的可行性及机制。